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為使儀器保持*工作狀態(tài)應(yīng)建立維護(hù)和校正儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP),所要控制的儀器包括移液器(加樣槍?zhuān)?,水浴箱(溫箱),洗板機(jī)和酶標(biāo)儀。
◎移液器:ELISA加樣量?。?-100ul),其準(zhǔn)確性直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,利用稱(chēng)重法檢查:吸取刻度指示量的水,萬(wàn)分之一天平稱(chēng)重后計(jì)算吸量是否準(zhǔn)確,一般應(yīng)在±10%以?xún)?nèi);
◎水浴箱 經(jīng)常檢查水浴箱溫度計(jì)所示的溫度和水中(或溫箱內(nèi))實(shí)測(cè)溫度是否一致,人ELISA試劑盒允許有±1℃的誤差;
◎洗板機(jī) 每個(gè)廠家設(shè)置洗板后的殘留液有各自的規(guī)定一般不超過(guò)2ul ,人工扣板時(shí),墊紙不濕,定期檢查管孔是否堵塞;
◎酶標(biāo)儀 經(jīng)常維護(hù)其光學(xué)部分,防止濾光片霉變,人ELISA試劑盒定期檢測(cè)校正,使其保持良好的工作性能。
附1:酶標(biāo)儀校正程序
◎?yàn)V光片波長(zhǎng)精度檢查:將不同波長(zhǎng)的濾光片從酶標(biāo)儀上卸下,用UV-2201型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(波長(zhǎng)精度±0.3nm)于可見(jiàn)光區(qū)對(duì)每個(gè)濾光片進(jìn)行掃描,其檢測(cè)值與標(biāo)定值之差為濾光片波長(zhǎng)精度。
◎通噵差與孔間差檢測(cè):通道差檢測(cè)是取一只酶標(biāo)板小孔杯(杯底須光滑,透明,無(wú)污染以酶標(biāo)板架作載體, 將其(內(nèi)含200ul甲基橙溶液吸光度調(diào)至0.500A左右)置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置,蒸溜水調(diào)零,1于490nm處連續(xù)測(cè)三次,觀察其不同通道的檢測(cè)器測(cè)量結(jié)果的一致性,可用極差值來(lái)表示??组g差的測(cè)量是選擇同一廠家,同一批號(hào)酶標(biāo)2板條(8條共96孔)分別加入200ul甲基橙溶液(吸光度調(diào)至0.100A左右)先后置于同一通道,蒸溜水調(diào)零,于490nm處檢測(cè),其誤差大小用±1.96s衡量。
n 零點(diǎn)飄移(穩(wěn)定性觀察):取8只小孔杯分別置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置,均加入200ul蒸溜水并調(diào)零,于490nm處每隔30分鐘測(cè)一次,觀察各個(gè)通道4小時(shí)內(nèi)吸光度的變化。
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