過培養(yǎng)法
實(shí)驗(yàn)方法原理
實(shí)驗(yàn)材料 細(xì)菌
試劑、試劑盒 胰化蛋白胨酵母提取物氯化鈉NaOH
儀器、耗材 接種針培養(yǎng)瓶搖床
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 取5 ml 液體培養(yǎng)基加入一支無菌的16 mm 或18 mm 的培養(yǎng)試管中。
2. 用接種環(huán)挑一個(gè)單菌落，浸沒于培養(yǎng)液中并輕輕振動(dòng)接種環(huán)，使待接種的細(xì)菌分散在培養(yǎng)液中。
3. 蓋好試管，在搖床或轉(zhuǎn)鼓式培養(yǎng)裝置上以60 r/min 速度。
4. 于37 ℃培養(yǎng)至飽和（約6 h）新鮮培養(yǎng)至飽和期的培養(yǎng)液細(xì)菌濃度大約為1X109~2X109細(xì)胞/ml。
大體積培養(yǎng)法
實(shí)驗(yàn)材料 細(xì)菌
試劑、試劑盒 胰化蛋白胨酵母提取物氯化鈉NaOH
儀器、耗材 接種針培養(yǎng)瓶搖床
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 按1：100的比例將過培養(yǎng)物加入到一個(gè)無菌燒瓶中，燒瓶的體積應(yīng)該是培養(yǎng)液體積的5倍以上。
2. 于37℃，約300 r/min 劇烈揺動(dòng)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)
1. 如果不揺動(dòng)培養(yǎng)細(xì)胞，所用燒瓶的體積應(yīng)比培養(yǎng)液體積大20倍以上。
細(xì)菌培養(yǎng)的檢測
實(shí)驗(yàn)材料 細(xì)菌
儀器、耗材 顯微鏡玻片蓋玻片滴管
實(shí)驗(yàn)步驟
一、利用計(jì)數(shù)板檢測
1. 用一片干凈的蓋玻片蓋住一片干凈的計(jì)數(shù)玻片或者petraff-Hausser小室，參見下面。
2. 用含少量培養(yǎng)液的吸管接觸蓋玻片的邊緣。
3. 在相差顯微鏡400倍下觀察，并且按一個(gè)小方塊中所見的每個(gè)細(xì)菌大約相當(dāng)于2×107細(xì)胞/ml，計(jì)算濃度。
二、利用分光光度計(jì)檢測
1. 稀釋培養(yǎng)液至OD600＜1。
2. 按每0.1OD值大約相當(dāng)于108細(xì)胞/ml計(jì)算細(xì)菌濃度。
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