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技術(shù)文章

血漿游離血紅蛋白測(cè)定

閱讀：263發(fā)布時(shí)間：2016-8-17

實(shí)驗(yàn)原理

　　血紅蛋白具有類過氧化物酶活性，可催化H2O2釋放新生態(tài)氧，使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化，由無(wú)色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，可測(cè)出其含量。

實(shí)驗(yàn)方法

　　材料：

　　1．2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液

　　2．1%H2O2

　　3．10%醋酸溶液

　　4．分光光度計(jì)

　　方法：

　　1.抽取靜脈血2-3ml，*抗凝，離心分離血漿。

　　2．按下表進(jìn)行操作，用分光光度計(jì)，波長(zhǎng)為530nm，以空白管調(diào)零，測(cè)定測(cè)定管的吸光度。

試劑 （ml）

測(cè)定管

空白管

2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液

0.5

0.5

患者血漿

0.02

/

1% H2O2

0.5

0.5

混勻后室溫放置10min

10%醋酸溶液

5.0

5.0

室溫放置10min

　　3.計(jì)算公式

　　血漿游離Hb(mg/L)=測(cè)定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

　　參考范圍：0-40mg/L

注意事項(xiàng)

　　1.一切容器避免血紅蛋白污染；

　　2.采血要順利，器皿要干燥，檢測(cè)血漿要新鮮，及時(shí)分離，防止人為溶血；

　　3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性，檢測(cè)時(shí)要小心，廢液要妥善處理，以免污染；

　　4.雙氧水要新鮮配置，濃度要準(zhǔn)確。


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