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上海酶聯(lián)生物研究所

ELISA試劑盒的試驗(yàn)原理

時(shí)間:2018-2-6閱讀:154
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ELISA試劑盒試驗(yàn)zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、安穩(wěn),在去除洗刷過(guò)程中的一些非特異結(jié)合上很有用。但它們只在存在時(shí)起作用,ELISA試劑盒由于很容易被洗掉。因而一切洗刷液中也必須添加封閉液。請(qǐng)勿運(yùn)用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%),它會(huì)下降特異結(jié)合,產(chǎn)生假陰性。另一個(gè)挑選 是運(yùn)用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液,后者可幫忙洗刷過(guò)程中的封閉。

 

蛋白封閉液則有所不同,是*的。它們與敞開(kāi)位點(diǎn)結(jié)兼并封閉,一起安穩(wěn)與微孔板結(jié)合的抗原分子。常用的蛋白封閉液包含牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶 粉、正常血清和魚(yú)明膠。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有用阻攔許多不同類型的分子相互作用。不過(guò),它的缺陷在于能與ProteinA和IgG抗體相互作用。處理這個(gè)問(wèn)題的一種辦法是運(yùn)用雞或魚(yú)的正常血清。

 

檢測(cè)試劑要適量
另一點(diǎn)也很清楚明了:切勿運(yùn)用過(guò)多的檢測(cè)試劑。假如濃度過(guò)高,或許未正確稀釋,則會(huì)導(dǎo)致高布景。也不要顯色過(guò)度,如有必要,優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)參加停止液。

 

抗體濃度須優(yōu)化
ELISA試劑盒試驗(yàn)咱們通常會(huì)跟著師兄師姐留下來(lái)的操作過(guò)程,ELISA試劑盒但是假如試劑稍有不同,則可能需求優(yōu)化抗體的量。記住,非特異的抗體結(jié)合會(huì)添加布景。為了避免這一點(diǎn),切勿運(yùn)用過(guò)多的一抗或二抗。

 

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