ELISA試劑盒檢查體系可謂是免疫學(xué)反響應(yīng)用到科研出產(chǎn)中zui為靈敏的技術(shù)手段。
但是在新老手操作過程中總是會呈現(xiàn)或大或小的問題，有時因?yàn)樵囼?yàn)的需求，包被原的特殊性也也許選用中性的緩沖溶液來包。
酶標(biāo)板靈敏度過高。
應(yīng)留意以下原理：因?yàn)榈鞍踪|(zhì)與聚苯乙烯固相載體是經(jīng)過，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體外表的疏水基團(tuán)間的效果，這種物理吸附對錯特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)一般富含更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體外表。
做直接ELISA試劑盒法測試小鼠血清中的IgE抗體，設(shè)空白對照、和陰性對照、陽性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬、10萬、20萬不等，用的是*符號的羊抗鼠IgE抗體，和親和素的辣根過氧化物酶。
ELISA試劑盒加樣時的防錯小經(jīng)驗(yàn)
(1)用一張寫滿字的紙，字越多越好，比如報紙，墊在下面，這么，加過標(biāo)本的小孔看過去下面的字會變小，沒加的字正常，十分簡單區(qū)別。
(2)能夠利用液面反光與沒有加的孔加以差異
(3)在標(biāo)本加完后，再把加樣槍全壓下，使液面發(fā)生小氣泡，也能夠加以區(qū)別。
但是成果除了空白對照孔沒有色彩外，其他各孔全有色彩，并且OD值都相差不大，為何?
也許因素如下：
(1) 水質(zhì)被金屬離子等污染;避免方法盡量運(yùn)用新鮮水或蒸餾水。
(2) 洗刷不充沛，樣品中其它成分殘留或酶殘留;避免方法洗刷液應(yīng)注滿微孔，充沛洗刷。
(3) 移液頭重復(fù)運(yùn)用，未洗凈或消毒不*; 避免方法移液頭一次性運(yùn)用。
ELISA試劑盒一抗顯色時間的控制等等，對于ELISA試劑盒的每一步都要留意才行。