ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。
下面分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法一、選擇試劑
選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
二、加樣
可能原因：
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣; 2)手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
ELISA試劑盒解決辦法：
1) 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 2) 加樣后及時放入孵箱。3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
三、 孵育
可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*; 2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。
解決辦法：
1) 貼封片或加蓋; 2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
四、洗板
可能原因：
1) 采用手工洗板，孔與孔之間液體交叉。 2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞，抽吸不*;洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
ELISA試劑盒解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干; 2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。