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上海酶聯(lián)生物研究所

體外誘導(dǎo)大鼠成肌細(xì)胞轉(zhuǎn)化為成骨前體細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究

時(shí)間:2015-6-23閱讀:128
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   探討大鼠成肌細(xì)胞體外能否轉(zhuǎn)化為成骨前體細(xì)胞.
   方法:從新生大鼠骨骼肌分離單細(xì)胞,體外培養(yǎng),運(yùn)用差速貼壁法和(或)酶消化法純化細(xì)胞,培養(yǎng)至第3代時(shí),加入含重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(rhBMP-2)的培養(yǎng)液進(jìn)行誘導(dǎo),3周后對(duì)誘導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)行鑒定,其指標(biāo)包括:細(xì)胞形態(tài)、堿性磷酸酶染色及其活性、Ⅰ型膠原免疫組化染色和鈣結(jié)節(jié)染色,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 9.1.3軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析.
   結(jié)果:成肌細(xì)胞誘導(dǎo)后,細(xì)胞增殖減緩,相鄰細(xì)胞聚集呈層狀排列,誘導(dǎo)7 d可見胞漿有少量不透光結(jié)節(jié),誘導(dǎo)2周結(jié)節(jié)增多,3周時(shí)胞漿內(nèi)可見大量不透光結(jié)節(jié),對(duì)照組成肌細(xì)胞融合成有收縮性的肌管.誘導(dǎo)后的成肌細(xì)胞堿性磷酸酶活性隨時(shí)間延長(zhǎng)而增強(qiáng),誘導(dǎo)3周時(shí)堿性磷酸酶染色、Ⅰ型膠原和鈣結(jié)節(jié)染色均呈陽(yáng)性表達(dá).
   結(jié)論:大鼠成肌細(xì)胞在體外一定條件下誘導(dǎo)后能夠轉(zhuǎn)化為成骨前體細(xì)胞.

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