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一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。ELISA試劑盒可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、人ELISA檢測試劑盒或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。為了優(yōu)化靈敏度,建議孵育標準品和標本。若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。
ELISA試劑盒的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點,人ELISA檢測試劑盒珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用。
可用作ELISA試劑盒測定的標本十分廣泛,體液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體 或抗原成份。人ELISA檢測試劑盒有些標本可直接進行測定(如血清 、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。這些標本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。
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