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行業(yè)產(chǎn)品

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T4 DNA連接酶

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地鹽城市

聯(lián)系方式:邵大衛(wèi)查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2015-06-10 15:14:15瀏覽次數(shù):202次

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經(jīng)營(yíng)模式:經(jīng)銷(xiāo)商

商鋪產(chǎn)品:7536條

所在地區(qū):江蘇鹽城市

聯(lián)系人:邵大衛(wèi) (銷(xiāo)售經(jīng)理)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

T4 DNA連接酶是來(lái)自感染T4噬菌體的大腸桿菌,催化雙鏈DNA平頭末端或黏性末端相鄰核酸的5′-PO4和3′-OH連接反應(yīng)的酶,還可催化雙鏈RNA和雙鏈RNA或DNA連接,但不能催化單鏈核酸的連接??尚扪a(bǔ)在雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA雜種分子中的單鏈切口。

詳細(xì)介紹

[產(chǎn)品名稱(chēng)]T4 DNA連接酶
[規(guī)格]BR
[包裝]1KU

英文名稱(chēng):T4 DNA Ligase 

分子量:55.3kDa,單體

級(jí)別:BR
來(lái)源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌

活性定義:是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中,37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1個(gè)weiss單位相當(dāng)于約200個(gè)粘性末端連接單位。1個(gè)粘性末端連接單位:20ul反應(yīng)體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)5-DNA末端)中,在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量) 
抑制劑:當(dāng)反應(yīng)體系中NaC1KC1的濃度超過(guò)200 mM時(shí),可強(qiáng)烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:T4 DNA LigaseDNA結(jié)合會(huì)改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現(xiàn)象,電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存;轉(zhuǎn)化時(shí),連接產(chǎn)物的體積不得超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積中的10%;電轉(zhuǎn)化之前,先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物
質(zhì)量控制:測(cè)試表明無(wú)內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測(cè):粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀(以下信息僅供參考):液體。該酶催化雙鏈DNARNA中毗鄰的5'磷酸基團(tuán)和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNADNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對(duì)單鏈核酸無(wú)酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNADNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù);連接酶介導(dǎo)的RNA檢測(cè);位點(diǎn)特異性突變;擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性
保存: -20°C


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