大腸菌群顯色培養(yǎng)基成份 (g/L)
特殊營養(yǎng)物質(zhì) | 47.55 |
顯色劑 | 0.35 |
瓊脂 | 13.0 |
pH 7.0-7.2 25 ℃ |
此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得*的結(jié)果。
大腸菌群顯色培養(yǎng)基注意
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。
用法
稱取本品 47.9g 加入 1000ml 蒸餾水，加熱溶解并不停攪拌，煮沸不要超過 1 分鐘。分裝三角瓶， 116 ℃ 高壓滅菌 15 分鐘。取 1ml 制備好的樣品液加入直徑為 9cm 無菌平皿中心，傾入冷卻至 45 -50 ℃ 培養(yǎng)基約15ml ，混勻，凝固后， 36 ± 1 ℃ 倒置培養(yǎng) 18 ～ 24h 。或冷卻至 45-50 ℃時(shí)，傾入無菌平皿，瓊脂*凝固后，在 37 ℃的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時(shí)，加入適當(dāng)稀釋度的樣品液 1ml ，涂布于培養(yǎng)基上， 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 18 ～ 24h 。
貯存
制備好的平板應(yīng)立即使用，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處， 保存溫度 2-8 ℃，注意避光保存。
失效
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟
1 、按國家標(biāo)準(zhǔn)、 SN 標(biāo)準(zhǔn)、 FDA 標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液
2 、取樣品液 1ml 加入 冷卻至 45-50 ℃顯色培養(yǎng)基中混勻或 涂布于平板上
3 、 36 ± 1 ℃ 培養(yǎng) 18 ～ 24h ，選用有 30 ～ 200 個(gè)菌落的平板，計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型大腸菌群菌落。大腸菌群典型菌落為藍(lán)綠色，其它細(xì)菌為無色或黃色菌落。
總大腸菌群 = 藍(lán)綠色菌落
4 、對可疑大腸菌群菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上， 36 ± 1 ℃ 培養(yǎng) 12-16 小時(shí)，挑取單菌落做大腸菌群 BGLB 發(fā)酵試驗(yàn)。
質(zhì)量控制
1 、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻，具有良好的流動性，呈乳白色。制備好的平板呈透明無色固體培養(yǎng)基。
2 、微生物試驗(yàn)
在 36 ± 1 ℃ 培養(yǎng) 18 ～ 24h 小時(shí)：
質(zhì)控菌株 | ATCC | 生長情況 | 菌落顏色 |
單增李氏菌 | 27853 | -/+ | 無色 |
* | 25923 | -/+ | 無色 |
大腸桿菌 | 25922 | +++ | 藍(lán)色 |
沙門氏菌 |
| +++ | 無色 |
大腸菌群 |
| +++ | 藍(lán)色 |
方法的局限性
本培養(yǎng)基鑒定 大腸菌群 ，少數(shù)情況下可能會出現(xiàn)假陽性，但不會出現(xiàn)假陰性，有時(shí)可能需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。
典型特征
大腸菌群典型菌落為藍(lán)綠色，其它細(xì)菌為無色或黃色菌落。
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