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閱讀:238發(fā)布時間:2017-4-27
ELISA試劑盒在收集標(biāo)本前都必須有一個完好的計劃,必須理解要查看的成份是不是滿足安穩(wěn)。新鮮標(biāo)本應(yīng)盡早查看,對收集后當(dāng)天就進(jìn)行查看的標(biāo)本,應(yīng)及時儲存在4℃?zhèn)溆?。如因格外因素需要守時、多次收集標(biāo)本,請選材后,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或以下條件下保存。由于蛋白樣品多不安穩(wěn),很簡單降解,應(yīng)防止重復(fù)凍融,以削減對實驗的影響。今日我們和我們同享ELISA實驗中樣本的收集方法:
一、液體類標(biāo)本,液體類標(biāo)本包含血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
血清:室溫血液天然凝聚10-20分鐘后,離心20分鐘支配(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的請求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘支配(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
尿液:用無菌管收集。離心20分鐘支配(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此施行。
細(xì)胞培養(yǎng)上清:查看排泄性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘支配(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。查看細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(pH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度到達(dá)100萬/ml支配。通過重復(fù)凍融,以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘支配(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
二、組織標(biāo)本:收集標(biāo)本后,稱取組織毛重,用液氮靈敏冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后要保存在2-8℃的溫度,參與一定量的PBS(pH7.2-7.4),用手工或電動勻漿器將標(biāo)本充沛勻漿。4℃離心(10000-15000轉(zhuǎn)/分)10-20分鐘。收集上清,留取恰當(dāng)查看,其他冷凍保存?zhèn)溆谩?br />備注:假設(shè)樣本中的待檢物需要提純,請客戶自行處理。
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