ELISA的技能點我們了解多少
為了得到非常好的試驗成果，一些ELISA試劑盒試驗新手們還需多加了解技能內(nèi)容，公司每周都會為您精心整理出重點技能方法，可以嫻熟的掌握好這些以后再應用到試驗里面就會簡略的多。今天的主要內(nèi)容ELISA試劑盒的一些技能關鍵：
樣本加樣方法
1、細胞上清：前處理有必要是細胞離心去掉，每孔直接加100μl即可。假如濃度太高需稀釋時，用規(guī)范品稀釋液直接稀釋。
2、腦脊液：前處理有必要是細胞離心去掉，每孔直接加100μl即可。假如濃度太高需稀釋時，用規(guī)范品稀釋液直接稀釋。
3、血清血漿：請參加50ul樣本剖析緩沖液后加50ul標本,如稀釋量大，請將樣本與樣本剖析緩沖液等量參加，缺乏部分用規(guī)范品稀釋液彌補至100ul。
4、安排勻漿液的樣本，要制備過程中需要在緩沖液中參加蛋白酶按捺劑，防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解，形成檢查成果的值偏低。
A.血清標本應是自然凝結(jié)后，取上清，防止在冰箱中凝結(jié)血液；
B.血漿標本，引薦用EDTA的方法搜集若待測樣本不能及時檢查，標本搜集后請分裝，凍存于－20℃，防止反復凍融。
c.血清標本不該增加任何防腐劑或抗凝劑；
D.標本應明澈通明，檢查前樣本中如有懸浮物應經(jīng)過離心去掉。
E.請勿運用溶血，高血脂或污染的標本檢查，不然成果將不。
因安排勻漿液的樣本蛋白品種多，含量豐厚，試驗參照血清血漿標本的處理方法進行，不然就會影響試驗成果。詳細是參加50ul樣本剖析緩沖液后加50ul標本，需稀釋時，請將樣本與樣本剖析緩沖液等量參加，缺乏部分用規(guī)范品稀釋液彌補至100ul。
因為方針蛋白不一樣，也許形成降解的蛋白類型也許不一樣，假如試驗前經(jīng)過文獻斷定用哪種蛋白酶按捺劑，有針對性參加，可節(jié)約按捺劑。假如查不到有關文獻，可采用組合按捺的方法保證蛋白不易被降解。
