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紀(jì)寧(上海)科研試劑經(jīng)銷商
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閱讀:293發(fā)布時(shí)間:2016-12-29
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檢驗(yàn)方法詳解:
(1)使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
(2)取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
(3)空白對照孔加樣品稀釋液100μl,陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl,樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
(4)混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。
(5)扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。
(6)每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外),置37℃反應(yīng)30分鐘。
(7)洗滌,同步驟5。
(8)每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
(9)每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)加樣須注意如下問題:
1、吸取樣品時(shí),加樣槍吸頭不應(yīng)黏附多余的液體,加樣時(shí)不可90度向孔中滴加液體,這樣會導(dǎo)致液體殘留在吸頭上,加樣不準(zhǔn)確。
2、不要將吸頭伸入孔中,一方面若接觸孔底可能壓彎吸頭,另一方面可能會將孔中的液體吹起來,加樣不準(zhǔn)確。
3、正確的加樣方法應(yīng)為45度,吸頭貼著孔壁加入,應(yīng)注意:
1)角度太小,會使液體殘留在孔壁上,導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確。
2)吸頭應(yīng)當(dāng)貼著管壁和液面的交界處。
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