乳酸含量(LA)測(cè)試盒_糖酵解系列_分光光度法
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
注 意 ：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
乳酸是生物體代謝過(guò)程中重要的中間產(chǎn)物，與糖代謝、脂類(lèi)代謝、蛋白質(zhì)代謝及細(xì)胞內(nèi)能量
代謝密切相關(guān)，乳酸含量是評(píng)估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標(biāo)。
乳酸含量(LA)測(cè)試盒_糖酵解系列_分光光度法
測(cè)定原理：
乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸，同時(shí)使NAD+還原生成NADH 和H+，H+傳遞給PMS
生成的 PMSH2 還原 INT 生成紅色物質(zhì)，在 530nm 處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、研缽、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制：
提取液：液體 55mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體 12mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1 支，-20℃避光保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水充分溶解。
試劑四：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加 15mL 蒸餾水充分溶解。
試劑五：粉劑×1 支，4℃避光保存。標(biāo)準(zhǔn)品：液體 1mL×1 支，4℃保存。
顯色液：臨用前根據(jù)用量按照提取液（V）：試劑三（V）：試劑四（V）：試劑五（m）=1（mL)： 0.3（mL)：3（mL)：15（mg）的比例充分混勻。（注意：現(xiàn)配現(xiàn)用，用多少配多少，在棕色瓶中配制，試劑盒中帶有 5 個(gè)棕色空瓶）
樣本處理：
1. 組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1mL
提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于 4℃，12000g 離心 10min，取上清測(cè)定。
2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí)間 3min）；于 4℃，12000g 離心 10min，取上清測(cè)定。
3. 血清：直接測(cè)定。
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