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上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司

當(dāng)前位置:上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司>>生化測(cè)試盒>>糖酵解系列>> 50管/48樣3磷酸甘油酸激酶PGK測(cè)試盒糖酵解系列分光法

3磷酸甘油酸激酶PGK測(cè)試盒糖酵解系列分光法

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)50管/48樣

品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所在地上海市

更新時(shí)間:2022-07-26 14:27:35瀏覽次數(shù):676次

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品牌 紀(jì)寧生物 貨期 現(xiàn)貨供應(yīng)
有效期 6個(gè)月 用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)使用
3磷酸甘油酸激酶PGK測(cè)試盒糖酵解系列分光法由上海紀(jì)寧生物公司提供,包括PGK檢測(cè)試劑盒說明書,免費(fèi)代測(cè),規(guī)格,包裝,品牌等關(guān)于有關(guān)本司測(cè)試盒所有產(chǎn)品的詳細(xì)介紹

3磷酸甘油酸激酶PGK測(cè)試盒糖酵解系列分光法

測(cè)定方法:分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

注   意 :正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義:

3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的關(guān)鍵酶,廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi),催化1,3-二磷酸甘油酸轉(zhuǎn)變?yōu)?-磷酸甘油酸,產(chǎn)生1分子ATP,具有影響DNA復(fù)制和修補(bǔ)及刺激病毒RNA合成等生物學(xué)功能,廣泛應(yīng)用于藥物靶標(biāo)設(shè)計(jì)。

3磷酸甘油酸激酶PGK測(cè)試盒糖酵解系列分光法

測(cè)定原理:

3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP產(chǎn)生1,3-二磷酸甘油酸和ADP,1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH作用下產(chǎn)生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸,340nm處的吸光度變化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿。

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試劑組成和配制 :

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體25mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑二:粉劑×1瓶,-20℃避光保存。臨用前加5mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

試劑三:粉劑×1瓶,-20℃避光保存。臨用前加2.5 mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

試劑四:粉劑×1瓶,-20℃避光保存。臨用前加2.5 mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

試劑五:粉劑×1瓶,-20℃避光保存。臨用前加10 mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

酶液提?。?br/>

①總PGK酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,500g離心5min,取上清測(cè)定。

②胞漿和葉綠體PGK酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液),冰浴勻漿后于4℃,500g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿PGK酶活性,取沉淀加1mL提取液,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,500g離心5min,取上清測(cè)定葉綠體中PGK酶活性。

建議測(cè)定總PGK酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的PGK,則按照步驟②提取粗酶液。


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