血清鐵濃度測(cè)試盒_離子系列_分光光度法
測(cè)定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
血清鐵是指血液中轉(zhuǎn)鐵蛋白所結(jié)合的鐵,該指標(biāo)常用于鑒別缺鐵性與非缺鐵性貧血。
血清鐵濃度測(cè)試盒_離子系列_分光光度法
測(cè)定原理:
亞硫酸鈉還原血清Fe3+生成成Fe2+,F(xiàn)e2+進(jìn)一步與2, 2’- 聯(lián)吡啶顯色,在520nm處有吸收峰,測(cè)定該波長(zhǎng)光吸收值即可計(jì)算血清鐵含量。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿、冰醋酸、氯仿和蒸餾水。
試劑組成和配置:
試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前配制,加入20 mL蒸餾水充分溶解。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前配制,加入625μL冰醋酸,加入20 mL蒸餾水充分溶解。
標(biāo)準(zhǔn)液:液體1mL×1支(EP管),10 μmol/L Fe3+標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。
測(cè)定:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到520 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 標(biāo)準(zhǔn)液解凍:提前取出標(biāo)準(zhǔn)液,置于室溫下充分解凍后混勻。
3. 空白管:取EP管,依次加入400 μL蒸餾水,400 μL試劑一,400 μL試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入200 μL氯仿(自備),充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液700 μL,加入1mL玻璃比色皿,于520 nm測(cè)定吸光度,記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,依次加入400 μL標(biāo)準(zhǔn)液,400 μL試劑一,400 μL試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入200 μL氯仿,充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液700 μL,加入1mL玻璃比色皿,于520 nm測(cè)定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 測(cè)定管:取EP管,依次加入400 μL血清,400 μL試劑一,400 μL試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入200 μL氯仿,充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液700 μL,加入1mL玻璃比色皿,于520 nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。