蛋白酶系列_糜蛋-白酶(Chymotrypsin)測試盒
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意 :正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
糜蛋-白酶,又稱胰凝-乳蛋-白酶,是胰腺分泌的一種蛋白水解酶,能迅速分解變性蛋白質(zhì)。糜蛋-白酶的功能與胰蛋-白酶相似,但是具有分解能力強(qiáng)、毒性低和不良反應(yīng)小等優(yōu)點。臨床上糜蛋-白酶用于痰液稀化,對膿性和非膿性痰液均有效;也用于創(chuàng)傷或手術(shù)后傷口愈合,如白內(nèi)障摘除。
蛋白酶系列_糜蛋-白酶(Chymotrypsin)測試盒
測定原理:
糜蛋-白酶催化ATEE水解,產(chǎn)物在237 nm有特征光吸收;通過測定237 nm 光吸收增加速率,來計算糜-蛋白酶活性。
自備儀器和用品:
臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加入20 mL蒸餾水充分溶解。
粗酶液提?。?br/>
組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即粗酶液。
測定步驟:
1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到237 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二置于37℃水浴中保溫30min。
3. 空白管:取微量石英比色皿/96孔板,加入20μL試劑一,200μL試劑二,混勻于237nm測定4min內(nèi)吸光值變化,記為△A空白管。(從吸光值穩(wěn)定增加開始計時)
4. 測定管:取微量石英比色皿/96孔板,加入20μL粗酶液,200μL試劑二,混勻于237nm測定4min內(nèi)吸光值變化,記為△A測定管。(從吸光值穩(wěn)定增加開始計時)
注意:空白管只需要測定一次。