天冬酰胺合成酶(AS)試劑盒_氮代謝系列
測(cè)定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
天冬酰胺合成酶是廣泛存在于生物體內(nèi)的一類(lèi)氨基轉(zhuǎn)移酶,催化谷氨酞胺的氨基向天冬氨酸轉(zhuǎn)移。當(dāng)植物處于氨毒時(shí)天冬酞胺的形成是一種解毒反應(yīng)。
天冬酰胺合成酶(AS)試劑盒_氮代謝系列
測(cè)定原理:
AS催化L-天冬酰胺水解成L-天冬氨酸和氨,利用奈氏試劑檢測(cè)氨增加的速率,即可計(jì)算其酶活性。
需自備儀器和用品:
臺(tái)式離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一×1瓶,60 mL,4 ℃保存;
試劑二×1瓶,20 mL,4 ℃保存;
試劑三×1瓶,30 mL,常溫保存;
試劑四×1瓶,10 mL,常溫保存;
試劑五×1瓶,6 mL,常溫保存;
試劑六×1瓶,6 mL,常溫避光保存。
粗酶液提?。?/p>
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL試劑一),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。