氧化型GSSG含量測試盒谷胱系列＿分光光度法
測定方法：分光光度法
產品規(guī)格：50管/48樣
注 意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
GSH/GSSG是細胞內重要的氧化還原對之一。因此，測定細胞內GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態(tài)，也是(GSSG)氧化還原循環(huán)的主要指標之一。
測定原理：
利用2-VP法測GSSG含量。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調節(jié)移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配置：
試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體300μL×1支，4℃保存。
試劑三：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體6mL×1瓶，4℃保存。
試劑五： 液體30μL×1瓶，-20℃保存。臨用前加入0.6 mL試劑三稀釋，4℃保存。
試劑六：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入40 mL試劑三溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用。
氧化型GSSG含量測試盒谷胱系列＿分光光度法
粗酶液提取：
1. 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清液（如上清不清澈，再離心3min）待測。
2. 細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；8000g 4℃離心10min，取上清液（如上清不清澈，再離心3min）的蒸餾水混勻待測。
3. 血清等液體：直接測定。
測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min，調節(jié)波長到412 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑三置于25℃（一般物種）或者37℃（哺乳動物）水浴中保溫30min。
3. 測定管：取1 mL EP管，加入100 μ L上清液，5μ L試劑二，蓋緊后混勻，置于37℃水浴30min；依次加入100 μ L試劑四，10 μ L試劑五，700 μ L試劑六，迅速混勻后，立即測定30 s和150 s光吸收A1和A2，計算ΔA=A2-A1。
環(huán)保在線