日前，有位客戶在留言中問道：“做內標法，說用的是內標物，這個內標物和對照品和標準品有什么不同呢？"針對該問題，我公司做出了一個全盤解析：

*、什么是內標物？
將一個已知質量，樣品中不含有雜質的純物質，加入至待測樣品溶液中，以此純物質的量為標準，對比測定待測組分的含量，該純物質稱為內標物。

內標物需滿足下列要求：能*溶解于樣品中，且不與待測組分發(fā)生化學作用；峰位盡可能與待測組分的峰位靠近，但能與待測組分*分開（分離度R≥1.5）的純物質。若得不到純品，必須預先測定其準確含量，且雜質峰不得干擾待測組分峰。

第二、ELIS試劑盒實驗內標法的優(yōu)點
測定的結果較為準確，由于通過測量內標物及被測組分的峰面積的相對值來進行計算的，因而在一定程度上消除了操作條件等的變化所引起的誤差。內標法的缺點是操作程序較為麻煩，每次分析時內標物和試樣都要準確稱量，有時尋找合適的內標物也有困難。 外標法簡便，但進樣量要求十分準確，要嚴格控制在與標準物相同的操作條件下進行，否則造成分析誤差，得不到準確的測量結果。

第三、ELIS試劑盒實驗內標物需滿足的條件
內標法是結合了峰面積歸一法和外標法的優(yōu)點的一種方法，它在加入內標后，按峰面積歸一法的分析方法進行分析，這就避免了由于進樣的一致性及樣品歧視效應導致的偶然誤差，因而，它的分析精密度也是比較高的，是氣相色譜的一種比較理想的定量分析方法。它的弱點是前處理比較復雜，所花費的時間也比較長，同時必須要有合適的標樣及內標物才能進行內標法定量分析。對于內標法定量分析來說，內標物的選擇是及其重要的。

它必須滿足如下的條件：
① 內標物與被分析物質的物理化學性質要相似；
② 內標物應能*溶解于被測樣品（或溶劑）中，且不與被測樣品起化學反應；
③ 內標物的出峰位置應該與被分析物質的出峰位置相近，且又不共溢出，目的是為了避免GC的不穩(wěn)定性所造成的靈敏度的差異；
④ 選擇合適的內標物加入量，使得內標物和被分析物質二者峰面積的匹配性大于75%，以免由于它們處在不同響應值區(qū)域而導致的靈敏度偏差。

第四、ELIS試劑盒實驗內標法的操作
① 將已知量的內標樣加入標準樣品，制成混合標樣，并配制一系列的已知濃度的工作標樣?；旌蠘藰又袠藰优c內標樣的摩爾比不變。
② 注入色譜柱，以（標樣峰面積/內標樣峰面積）為響應值。
③ 根據(jù)響應值與工作標樣濃度之間存在的線性關系，即W=f×A，制成標準曲線。
④ 將已知量的內標樣加入未知樣品，注入色譜柱，得到欲測組分的響應值。
⑤ 根據(jù)已知的系數(shù)f，即可求出欲測組分的濃度。

第五、ELIS試劑盒實驗內標法的特點
操作過程中樣品和內標是混合在一起注入色譜柱的，因此只要混合溶液中被測組分與內標的量的比值恒定，上樣體積的變化不會影響影響定量結果。
內標法抵消了上樣體積，乃至流動相、檢測器的影響，因此比外標法。