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ELISA試劑盒陰性對照與陽性對照有啥區(qū)別
陽性對照品(positive control)和陰性對照品(negative control)是檢驗試驗有效性的控制品,同時也作為判斷結(jié)果的對照,因此對照品,特別是陽性對照品的基本組成應(yīng)盡量與檢測標(biāo)本的組成相一致.以人血清為標(biāo)本的測定,對照品也為人血清,因為正常人血清在各種ELISA模式中可產(chǎn)生不同程度的本底.由于大量正常人血比較難得到,elisa試劑盒國外試劑盒中的對照品多以復(fù)鈣人血漿(recalcified human plasma)為原料,即在血漿中加入鈣離子,使其中的纖維蛋白質(zhì)凝固,除去凝塊后所得的液體,其組成與血清相似.陰性對照品須先行檢測,確定其中不含待測物質(zhì).例如HBsAg檢測的陰性對照品中不可含HBsAg,抗HBs也是陰性.陽性對照品多以含蛋白保護(hù)劑的緩沖液為基質(zhì),其中加入一定量的待檢物質(zhì),此量在試劑說明書中標(biāo)明.加入的量應(yīng)與試劑的敏感度相稱,在測定中得到的吸光值與受檢標(biāo)本吸光值比較,可對標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量有一個粗略的估計.ELISA試劑盒國外檢測HBsAg的檢測敏感度約為0.5ng/ml,陽性對照品中含量約為10ng/ml.在對照品中一般加入抗生素(antibiotic)和防腐劑,以利保存.
ELISA試劑盒定量測定的(例如甲胎蛋白質(zhì)癌胚抗原測定等)應(yīng)含有制作標(biāo)準(zhǔn)曲線用的參考標(biāo)準(zhǔn)品,應(yīng)包括覆蓋可檢測范圍的4-5個濃度,一般均配入含蛋白保護(hù)劑及防腐劑的緩沖液中. ELISA試劑盒陰性對照及陽性對照:陰 陽性對照若有正確的結(jié)果,對試劑盒操作的結(jié)果可以有粗略的判斷.空白對照:對ELISA試劑來說,空白對照實際上是不加標(biāo)本不加酶做對照.空白對照主要測系統(tǒng)的吸光率.空白對照在單波長測量時顯得尤其重要.
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