根據(jù)我公司進(jìn)口ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)部多年的經(jīng)驗(yàn)以及客戶們的咨詢問(wèn)題總結(jié)，整理分析出了幾個(gè)需要嚴(yán)格注意的方面，實(shí)驗(yàn)者們隨上海恒遠(yuǎn)來(lái)看一看吧（供參考）。

 1. 讀板時(shí)板底不清潔：難免洗板后板底有水漬，這也可能導(dǎo)致讀數(shù)不準(zhǔn)。

 2. 溫育溫度的選擇

說(shuō)明書表明的溫度可有兩種（①37℃下1小時(shí)、②43℃下45分鐘），從免疫測(cè)定的抗原抗體反應(yīng)的本質(zhì)來(lái)看，在較低的溫度下反應(yīng)較長(zhǎng)的時(shí)間zui為*。上海恒遠(yuǎn)生物建議在臨床ELISA試劑盒測(cè)定中盡量使用較低溫育溫度較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件。

 3. 采用手工洗板，孔與孔之間液體交叉：曾用洗瓶直接沖洗板。后來(lái)雖然也用槍逐孔洗板，但對(duì)此注意不夠。

 4. 加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡：終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。

 5. 加樣板過(guò)多、加樣速度慢，造成各孔反應(yīng)時(shí)間不均一：但溫度高時(shí)，加樣時(shí)間過(guò)長(zhǎng)將導(dǎo)致各孔時(shí)間的反應(yīng)時(shí)間不均一；還使得孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。如果連續(xù)做好幾塊板，則有可能使某些板不能及時(shí)洗板，也導(dǎo)致孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)。