人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit說明書

ELISA小常識：ELISA試驗條件固相載體的選擇：載體的種類比較多，其中包括纖維素、交聯(lián)右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。從使用形式上可有凹孔平板、試管、珠粒等。聚苯乙烯凹孔板是應(yīng)用zui廣泛的一種載體。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好，操作簡便、用量小，適于大批檢查。由于聚苯乙烯的工藝過程不是很穩(wěn)定,造成各批次差異比較大。所以進(jìn)行ELISA之前，必須進(jìn)行篩選。檢查方法：⑴ 吸附性能的檢查：先加抗體包被，然后加入同一稀釋度的酶標(biāo)抗體，zui后加底物、顯色、測OD值,求出總平均OD值,再求出每相鄰兩孔的OD平均值,此均值在總均值的±10%以內(nèi)為合格,若中間孔與四周孔OD值相差太大，或一側(cè)與另一側(cè)孔OD值相差較大均屬不合格。⑵ 對比測定陽性血清與陰性血清，觀察是否存在明顯差異，若二者OD值相差于10倍以上者為合格。板的處理。新板一般不用處理,用蒸餾水沖洗即可應(yīng)用。板用一次即廢。但不少實驗工作者認(rèn)為用超聲波處理，清潔液Tritonx100、20%乙二醇處理仍可應(yīng)用。但發(fā)現(xiàn)空白對照顯色較深和陽性樣品顯色結(jié)果不理想時，應(yīng)放棄不用。

人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit說明書

ELISA試劑盒的清洗操作注意事項 

(1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。 

(2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。 

(3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。 

(4)使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。 

(5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 

(6)洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。 

(7)底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。 

(8)加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。 

(9)按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit說明書

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