鮭魚補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒
樣本如何處理:應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形 成,應(yīng)再次離心。
尿液、胸腹水、腦脊液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分),仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
鮭魚補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒
溫育
◎抗原抗體反應(yīng)需要在一定溫度下(37°C),經(jīng)過一定的時(shí)間才能達(dá)到反應(yīng)的平衡點(diǎn)
◎ELISA邊緣效應(yīng)是由溫育形成的。所以溫育一般采用能 使反應(yīng)液溫度迅速達(dá)到平衡的水浴法。一種放在水浴箱的隔板上,另一種是放在溫箱的濕盒里。水要浸至板條的1/3處,不可將板條疊加放置。
◎邊緣效應(yīng)(2ng/mlHBsAg一步法三種不同溫育法的結(jié)果)
洗滌
◎ELISA是靠洗滌來達(dá)到分離結(jié)合與未結(jié)合抗原抗體復(fù)合物及酶標(biāo)記物的目的,同時(shí)洗滌也可將非特異吸附的蛋白質(zhì)的干擾以及血球、細(xì)菌中的酶干擾清除掉。
◎手工洗滌一般采用浸泡方法:1)甩去孔內(nèi)反應(yīng)液;
2)用洗滌液過洗一遍(即注滿孔后即甩去);
3)微孔重新注滿洗液后浸泡2-3分鐘,間歇搖動(dòng);
4)甩去孔內(nèi)液體,拍板,用紙吸干。
重復(fù)以上操作至少5次。注意各種試劑盒的洗滌液盡量不要混用。
◎洗板機(jī)洗板一定要預(yù)先把板架放平,使洗板機(jī)上的每個(gè)放液和吸液纖孔都能*地插入孔底,將孔內(nèi)液體全部吸干,同時(shí)要設(shè)置一定的浸泡時(shí)間。如出現(xiàn)機(jī)洗后拍板有較多殘留液時(shí)應(yīng)再用手工洗2次以上。關(guān)機(jī)前要用蒸溜水沖洗管道,避免堵孔。
鮭魚補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒
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