大鼠細(xì)胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA試劑盒
ELISA洗板注意事項:手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗滌次數(shù)不要超過說明書*的洗滌次數(shù),洗液在反應(yīng)孔內(nèi)滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孔間竄流,造成孔問污染,導(dǎo)致假陰性或假陽性。要保證加液量* 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn),造成顯色不統(tǒng)一,判斷錯誤。顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),顯色液量不能過多,以免顯色過強。
大鼠細(xì)胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA試劑盒
酶標(biāo)儀判讀結(jié)果
◎顯色反應(yīng)終止后應(yīng)立刻比色(30分鐘內(nèi))。
常見的顯色系統(tǒng)有OPD和TMB二種,以后者zui為常見,而TMB酸不易終止因此必須盡快比色以免影響結(jié)果。OPD終止后顯棕色,測定波長為490nm;
TMB終止后顯黃色,測定波長為450nm,
二種底物的校正波長均用630nm。
使用雙波長的優(yōu)點可以消除反應(yīng)板條上的劃痕手印的干擾。同時要注意反應(yīng)板應(yīng)用紙吸干后才能置酶標(biāo)儀中比色,否則吸光度易出現(xiàn)負(fù)值或損壞濾光片。
報告方式
◎定性試驗 國內(nèi)外為便于統(tǒng)一計算,一律按S/C.O方式報告,S為標(biāo)本A值,C.O即Cut Off值(陽性判定值)
◎夾心法和間接法以S/C.O≥1為陽性;
竟?fàn)幏ㄅc中和法以S/C.O﹤1為陽性
◎Cut Off的計算公式以試劑盒說明書的為準(zhǔn)常見的有:
◎A) C.O=2.1×N(當(dāng)N不足0.05時按0.05計),
◎此公式由P/N>2.1換算而來,常用于夾心法。
◎B) C.O=0.5×N,從抑止率公式換算而來,
◎常用于竟?fàn)?,中和?br />◎C) C.O=N+C(C為常數(shù)),用于間接法。
◎D) C.O=C×P+N(C為常數(shù)),用于間接法。此公式zui客觀,但對生產(chǎn)廠家要求很高,陰陽性對照測定值要基本恒定。
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