人胰島素(Insulin)ELISA試劑盒

實(shí)驗(yàn)原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被目標(biāo)物抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)物呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

人胰島素(Insulin)ELISA試劑盒

ABS-ELISA法

ABS為親和素(avidin)*(biotin)系統(tǒng)(system)的略語。親和素是一種糖蛋白，分子量60000，每個(gè)分子由4個(gè)能和*結(jié)合的亞基組成。*為小分子化合物，分子量244。用化學(xué)方法制成的衍*-羥基琥珀酰亞胺酯可與蛋白質(zhì)和糖等多種類型的大小分子形成*標(biāo)記產(chǎn)物，標(biāo)記方法頗為簡(jiǎn)便。*與親和素的結(jié)合具有很強(qiáng)的特異性，其親和力較抗原抗體反應(yīng)大得多，兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于一個(gè)親和素可與4個(gè)*分子結(jié)合，因此如把ABS與ELISA法可分為酶標(biāo)記親和素-*（LAB）法和橋聯(lián)親和素-*（ABC）法兩種類型。兩者均以*標(biāo)記的抗體（或抗原）代替原ELISA系統(tǒng)中的酶標(biāo)抗體（抗原）。在LAB中，固相*先與不標(biāo)記的親和素反應(yīng)，然后再加酶標(biāo)記的*以進(jìn)一步提高敏感度。在早期，親和素從蛋清中提取，這種卵親和素為堿性糖蛋白，與聚苯乙烯載體的吸附性很強(qiáng)，用于ELISA中可使本底增高。從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素則無此缺點(diǎn)，在ELISA應(yīng)用中有替代前者的趨勢(shì)。由于ABS-ELISA較普通ELISA多用了兩種試劑，增加了操作步驟，在臨床檢驗(yàn)中ABS-ELISA應(yīng)用不多。

人胰島素(Insulin)ELISA試劑盒