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人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2018-04-17 14:20:05瀏覽次數(shù):193次

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人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒

人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒操作步驟

    1. 包被抗原:用包被液將抗原作適當(dāng)稀釋, 一般為1~10微克/孔,每孔加200微升,37℃溫育1小時(shí)后,4℃冰箱放置16~18小時(shí)。

    2. 洗滌:倒盡板孔中液體,加滿洗滌液,靜放三分鐘,反復(fù)三次,zui后將反應(yīng)板倒置在吸水紙上,使孔中洗滌液流盡。

   3. 加封閉液200微升,37℃放置一小時(shí)。

   4. 洗滌同2。

   5. 加被檢血清:用稀釋液將被檢血清作幾種稀釋,,每孔200微升。同時(shí)作稀釋液對(duì)照。37℃放置2小時(shí)。

   6. 洗滌同2。

   7. 加辣根過(guò)氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小時(shí)。

   8. 洗滌同2。

   9. 加底物:鄰苯二胺溶液加200ml,室溫暗處10--15分鐘。

   10. 加終止液:每孔50微升。

   11. 觀察結(jié)果:用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀記錄490nm讀數(shù)。

 

人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒

ELISA中,用作固相載體的小珠一般為直徑0.6cm的圓珠,表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積大大增加。ELISA板孔的吸附面積約為200mm2,小珠均為1000mm2,將近ELISA板孔的5倍。吸附面積的增大即意味著固相抗原或抗體量的增加。再者,球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原決定簇或抗體結(jié)合位點(diǎn)的暴露面處于*反應(yīng)狀態(tài),因此珠式ELISA的反應(yīng)往往更為靈敏。小珠的另一特點(diǎn)是更易于使洗滌*,使用特殊的洗滌器,使小珠在洗滌過(guò)程中滾動(dòng)淋洗,其洗滌效果遠(yuǎn)較板孔的浸泡式為好。但由于磨砂工藝的難度較大,小珠的均一性較差。

 

人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒

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