江蘇科特是大的一家科研試劑供應(yīng)商，主營產(chǎn)品有：elisa試劑盒，生物試劑，標(biāo)準(zhǔn)品，培養(yǎng)基，血清，抗體，細(xì)胞等高產(chǎn)品。我們的宗旨是為了中國生命科學(xué)事業(yè)的騰飛，我們?nèi)σ愿?，以更好的品質(zhì)、更優(yōu)惠的價(jià)格、更專業(yè)的技術(shù)服務(wù)好每一位客戶的需求。

    細(xì)胞的凍存

    1．細(xì)胞：選對數(shù)生長期細(xì)胞，收集細(xì)胞24小時前換液一次。

    2．計(jì)數(shù)：按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)，令細(xì)胞密度達(dá)5×106/ml，離心去上清，吸入離心管中。

    3．凍存液：先用培養(yǎng)液9分＋DMSO 1分（或甘油）配成10％的DMSO凍存液，按上法一滴滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。

    4．分裝：分裝入無菌安剖中，每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。

    5．封口：用塑料安剖時擰緊瓶口即可；如用火焰封閉安剖口后，仔細(xì)檢查，定要封嚴(yán)，必要時可浸入藍(lán)色液中觀察，為安全起見，把安剖縫入紗布小袋中，以防液氮浸入后，融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人；紗袋一端系以線繩，末端扎有小牌，注明：細(xì)胞名稱，凍存日期，以便日后查找。

    細(xì)胞復(fù)蘇的方法

    1．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。

    2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。

    3．剪開紗布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。

    4．低速離心（500～1000轉(zhuǎn)/分）5分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。

    5．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。