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人N端前腦鈉素elisa試劑盒

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更新時(shí)間:2018-04-09 06:24:03瀏覽次數(shù):230次

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人N端前腦鈉素elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中酶標(biāo)比色儀的使用

    酶標(biāo)比色儀簡(jiǎn)稱酶標(biāo)儀,通常指于測(cè)讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對(duì)固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。許多試劑公司配套供應(yīng)酶標(biāo)儀。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有:測(cè)讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、精確度和可測(cè)范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可精確到0.001,準(zhǔn)確性為±1%,重復(fù)性達(dá)0.5%。舉例說,若某孔測(cè)得的A值為1.083,則該孔相對(duì)于空氣的真實(shí)A值應(yīng)為1.083±0.01(1.073~1.093),重復(fù)測(cè)定數(shù)次,其A值均應(yīng)1.083±0.05(1.078~1.088)在之間。酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍視各酶標(biāo)儀的性能而不同。普通的酶標(biāo)儀在0.000~2.000,新型號(hào)的酶標(biāo)儀上限拓寬達(dá)2.900,甚至更高。超出可測(cè)上限的A值常以"*"或"over"或其它符號(hào)表示。應(yīng)注意可測(cè)范圍與線性范圍的不同,線性范圍常小于可測(cè)范圍,比如某一酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍為0.000~2.900,而其線性范圍僅0.000~2.000,這在定量ELISA中制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)予注意。

    酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,操作時(shí)室溫宜在15~30℃,使用前先預(yù)熱儀器15-30分鐘,測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定。

測(cè)讀A值時(shí),要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰,如OPD用492nm波長(zhǎng)。有的酶標(biāo)儀可用雙波長(zhǎng)式測(cè)讀,即每孔先后測(cè)讀兩次,*次在zui適波長(zhǎng)(W1),第二次在不敏感波長(zhǎng)(W2),兩次測(cè)定間不移動(dòng)ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1,630nm為W2,zui終測(cè)得的A值為兩者之差(W1-W2)。雙波長(zhǎng)式測(cè)讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

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是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)。已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。

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