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當(dāng)前位置: 江蘇綠葉生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>滴加抗體注意事項(xiàng)
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因?yàn)槊看螌?shí)驗(yàn)前應(yīng)列出詳細(xì)實(shí)驗(yàn)計(jì)劃,其中包括實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、擬用方法、所用一抗和二抗的種類和效價、預(yù)實(shí)施的操作流程方案以及預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。實(shí)驗(yàn)分組編號用玻璃筆標(biāo)記在玻片上,對每一抗體均應(yīng)配以陽性和陰性對照。
以下關(guān)于滴加抗體操作注意事項(xiàng)作出詳細(xì)講解。
切片在血清封閉后,傾去多余血清,便可滴加*抗體。滴加前取出玻片,用吸水紙拭去組織周圍的液體,組織與細(xì)胞表面的液體要用濾紙條輕輕吸掉,但注意勿使 組織干燥,盡快滴加抗體工作液1滴(約50ul)于組織表面。由于切片周圍無液體,滴加的抗體成為一個液滴,這樣既可節(jié)省抗體,又可增加抗原與抗體結(jié)合的機(jī)會。如果玻片上是培養(yǎng)細(xì)胞,應(yīng)在鏡下選擇一個理想的區(qū)域用免疫組織化學(xué)油筆在此區(qū)域外圍畫一圓圈,再滴加抗體,爾后應(yīng)輕輕搖動切片數(shù)秒,以促進(jìn)抗體與組 織待測抗原的結(jié)合,避免假陰性小區(qū)的出現(xiàn)。這一操作過程雖然簡單,卻十分重要。加抗體時切忌加樣器或吸頭碰到組織或細(xì)胞,以免造成破損。
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