產品名稱：【CAS:9015-85-4,T4 DNA連接酶,T4 DNA Ligase】

英文名稱：T4 DNA Ligase 
CAS號：9015-85-4

級別：BR
分子量：55.3kDa，單體
來源：含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度：1u/ul(200CEU/ul）
活性定義：是指在ATP-PPi交換反應中，37℃、30分鐘內將1nmol [32PPi]轉換為Norit可吸收形式所需的酶量（weiss單位，1個weiss單位相當于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位：20ul反應體系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分鐘內連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產物所需的酶量） 
酶活性分析混合物：66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase緩沖液（#B69）：400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
50% PEG溶液：50%（w/v）聚乙二醇4000
抑制劑：當反應體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時，可強烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活：65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意：聚乙二醇（PEG）可*地增加平末端DNA的連接效率，PEG4000在反應體系中的*濃度為5%（w/v）；T4 DNA Ligase與DNA結合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率，為避免此現(xiàn)象，電泳前需處理樣本或分子量標準。樣本處理如下：樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存；轉化時，連接產物的體積不得超過感受態(tài)細胞體積中的10%；電轉化之前，先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase，然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產物
質量控制：測試表明無內切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測：粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀：液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵，還可以修復雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復合體中的單鏈切口，連接DNA的粘性和平末端，但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途：生化研究。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接；雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接；雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復合體中缺口的修復；連接酶介導的RNA檢測；位點特異性突變；擴增片段長度多態(tài)性
保存： -20°C

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6,7,8,9-四氫-5H-苯并環(huán)庚-5-酮，826-73-3，>97.0%(GC)，5G| T1347-5G
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2-乙基蒽醌，84-51-5，>98.0%(GC)，25G| E0063-25G
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四乙二醇單十二烷基醚，5274-68-0，>98.0%(GC)，5ML| T0769-5ML
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內-四氫二環(huán)戊二，2825-83-4，>97.0%(GC)，25G| T0409-25G
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CAS:54848-30-5 ,PROTOGRACILLIN(P) ASB-00016312-005
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農殘檢測混標(9種組分) 1mL 純度：Varied conc. in Toluene  Store at 2-8℃ AE-00021
CAS:15231-91-1,6-溴-2-萘酚 107171000
CAS:7440-22-4，銀 500mL 1000 μg/mL in 2-5% Nitric acid Room temperature AA53N-5
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