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沙門氏菌套裝生化鑒定管7種(SN1070)

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沙門氏菌套裝生化鑒定管7種(SN1070)
規(guī)格:20支/盒
用途:用于沙門氏菌生化鑒定

沙門氏菌套裝生化鑒定管7種(SN1070)

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含碳化合物的利用
細(xì)菌能否利用某些含碳化合物作為*碳源,反映該菌是否產(chǎn)生代謝這種化合物的有關(guān)酶系,因而作為鑒定依據(jù)。測(cè)定的基礎(chǔ)培養(yǎng)基配方很多,因種而異?,F(xiàn)介紹1種合成的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,有些細(xì)菌還可適當(dāng)補(bǔ)加各種維生素。培養(yǎng)基可制成液體,分裝試管,也可制成固體平板??捎糜跍y(cè)定的底物種類很多,有單糖、雙糖、糖醇、脂肪酸、羥基酸及其他有機(jī)酸、醇、各種氨基酸類胺類以及碳?xì)浠衔锏取L堑暮恳话銥?%,醇類酚類等的含量一般為0.1-0.2%,氨基酸的含量一般為0.5%。因碳?xì)浠衔锊蝗苡谒?,可在液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng),或加入到45℃的固體培養(yǎng)基中,振蕩后立即倒成平板。有些底物不宜用高壓滅菌,可用過濾法滅菌后加入已滅菌的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,某些醇類和酚類不必滅菌。
接種和觀察結(jié)果:菌種做成懸液,避免帶入少量碳源干擾試驗(yàn)結(jié)果。平板培養(yǎng)用接種環(huán)點(diǎn)種,液體培養(yǎng)則用直針接種。每一測(cè)定菌必須接種未加碳水化合物的空白基礎(chǔ)培養(yǎng)基作對(duì)照。
適溫培養(yǎng)2、5、7天后觀察,凡測(cè)定菌在有碳水化合物的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)情況,明顯超過空白培養(yǎng)基的生長(zhǎng)量為陽(yáng)性,否則為陰性。假若兩種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況差別不明顯,開在同一培養(yǎng)基上連續(xù)移種3次,如差別仍不明顯則以陰性論。
7、葡萄糖的氧化發(fā)酵試驗(yàn)
在細(xì)菌鑒定中,糖類發(fā)酵產(chǎn)酸是1項(xiàng)重要依據(jù)。細(xì)菌對(duì)糖類的利用有2種類型:1種是從糖類發(fā)酵產(chǎn)酸,不需要以分子氧作為zui終受氫體,稱發(fā)酵型產(chǎn)酸;另一種則以分子氧作為zui終受氫體,稱氧化型產(chǎn)酸。前者包括的菌種類型為多數(shù)。氧化型產(chǎn)酸量較少,所產(chǎn)生的酸常常被培養(yǎng)基中的蛋白胨分解時(shí)所產(chǎn)生的胺所中和,而不表現(xiàn)產(chǎn)酸。為此,Hugh和Leifson提出一種含有低有機(jī)氮的培養(yǎng)基,用以鑒定細(xì)菌從糖類產(chǎn)酸是屬氧化型產(chǎn)酸或發(fā)酵型產(chǎn)酸。這一試驗(yàn)廣泛用于細(xì)菌鑒定。一般用葡萄糖作為糖類代表。也可利用這一基礎(chǔ)培養(yǎng)基來(lái)測(cè)定細(xì)菌從其他糖類或醇類產(chǎn)酸的能力。
(1)接種 :以18-24h的幼齡菌種,穿刺接種在上述培養(yǎng)基中,每株菌接4管,其中2管用油封蓋(凡士林:液體石蠟=1:1混合后滅菌),約加0.5-1厘米厚,以隔絕空氣為閉管。另2管不封油為開管,同時(shí)還要有不接種的閉管作對(duì)照。適溫培養(yǎng)1、2、4、7天觀察結(jié)果。
(2)結(jié)果觀察:氧化型產(chǎn)酸――僅開管產(chǎn)酸,氧化作用弱的菌株往往先在上部產(chǎn)堿(1-2d),后來(lái)才稍變酸。發(fā)酵型產(chǎn)酸則開管及閉管均產(chǎn)酸,如產(chǎn)氣,則在瓊脂柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡。
8、糖或醇類發(fā)酵試驗(yàn)
不同微生物分解利用糖類的能力有很大差異,或能利用或不能利用,能利用者,或產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣??捎弥甘緞┘鞍l(fā)酵管檢驗(yàn)。
試驗(yàn)方法:以無(wú)菌操作,用接種針或環(huán)移取純培養(yǎng)物少許,接種于發(fā)酵液體培養(yǎng)基管,若為半固體培養(yǎng)基,則用接種針作穿刺接種。接種后,置36±1.0°C培養(yǎng),每天觀察結(jié)果,檢視培養(yǎng)基顏色有無(wú)改變(產(chǎn)酸),小倒管中有無(wú)氣泡,微小氣泡亦為產(chǎn)氣陽(yáng)性,若為半固體培養(yǎng)基,則檢視沿穿刺線和管壁及管底有無(wú)微小氣泡,有時(shí)還可看出接種菌有無(wú)動(dòng)力,若有動(dòng)力、培養(yǎng)物可呈彌散生長(zhǎng)。
本試驗(yàn)主要是檢查細(xì)菌對(duì)各種糖、醇和糖苷等的發(fā)酵能力,從而進(jìn)行各種細(xì)菌的鑒別,因而每次試驗(yàn),常需同時(shí)接種多管。一般常用的指示劑為酚紅、溴甲酚紫,溴百里藍(lán)和An-drade指示劑。
注:對(duì)于糖醇類發(fā)酵現(xiàn)在一般用糖、醇類細(xì)菌微量生化鑒定管在36℃18-24h即可出結(jié)果。
9、硝酸鹽(Nitrate)還原試驗(yàn)
有些細(xì)菌具有還原硝酸鹽的能力,可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽、氨或氮?dú)獾取喯跛猁}的存在可用硝酸試劑檢驗(yàn)。
試驗(yàn)方法:臨試前將試劑的A(磺胺酸冰醋酸溶液)和B(α-萘胺乙醇溶液)試液各0.2ml等量混合、取混合試劑約0.1ml、加于液體培養(yǎng)物或瓊脂斜面培養(yǎng)物表面,立即或于10min內(nèi)呈現(xiàn)紅色即為試驗(yàn)陽(yáng)性,若無(wú)紅色出現(xiàn)則為陰性。
用α-萘胺進(jìn)行試驗(yàn)時(shí),陽(yáng)性紅色消退很快、故加入后應(yīng)立即判定結(jié)果。進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)必須有未接種的培養(yǎng)基管作為陰性對(duì)照。α-萘胺具有致癌性、故使用時(shí)應(yīng)加注意。

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