小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞 NOR-10細(xì)胞
細(xì)胞中無機鹽的含量很少,約占細(xì)胞總重的1%。鹽在細(xì)胞中解離為離子,離子的濃度除了具有調(diào)節(jié)滲透壓和維持酸堿平衡的作用外,還有許多重要的作用。主要的陰離子有Cl-、PO4-和HCO3-,其中磷酸根離子在細(xì)胞代謝活動中zui為重要:
①在各類細(xì)胞的能量代謝中起著關(guān)鍵作用;
②是核苷酸、磷脂、磷蛋白和磷酸化糖的組成成分;
③調(diào)節(jié)酸堿平衡,對血液和組織液pH起緩沖作用。
小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞 NOR-10細(xì)胞
CHO-K1 中國倉鼠卵巢細(xì)胞
COS-1 非洲綠腎
COS-7 非洲綠猴腎細(xì)胞
CV-1 猴腎細(xì)胞
IAR20 小鼠肝細(xì)胞
IEC-6 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞
LL-PK1, 豬腎細(xì)胞
MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨細(xì)胞
MDCK 狗腎細(xì)胞
MEF 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
NIH3T3 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
P815 小鼠肥大細(xì)胞
PA12 小鼠成纖維細(xì)胞
RTE 大鼠氣管上皮細(xì)胞
【研究范圍】僅供科研使用
【細(xì)胞特征】每兩到三天進行換液。細(xì)胞應(yīng)當(dāng)在融合前傳代
【細(xì)胞培養(yǎng)表述】
一、態(tài)觀察。細(xì)胞膜是每天必須觀察的,看是否清晰,細(xì)胞的死亡往往是從細(xì)胞膜的破裂開始的,早期的表現(xiàn)就是細(xì)胞膜某一點出現(xiàn)欠完整或者毛發(fā)影。
二、細(xì)胞往往會有“抱團”現(xiàn)象,抱團生長或死亡,個人認(rèn)為應(yīng)該勤換液或傳代,盡量避免細(xì)胞抱團。
三、長迅速,強烈建議用較大的培養(yǎng)瓶養(yǎng),用小瓶養(yǎng)的話,換液不及時,很容易死亡。細(xì)胞的生長速度一般為2天左右就需要傳代,并且一般為一傳三,或一傳四。
四、培養(yǎng)液:1640培養(yǎng)液,1L一般加*2g,并加雙抗,胎牛血清濃度*為12%,zui低不低于10%,細(xì)胞對胎牛血清高度依賴。培養(yǎng)液PH應(yīng)調(diào)為7.20-7.40之間。
五、防污染。細(xì)胞生長迅速,較少發(fā)生污染,但常規(guī)措施應(yīng)該做好。比如無菌操作,酒精消毒等,培養(yǎng)瓶口建議過火,包括瓶蓋,應(yīng)過火4秒左右。
六、凍存。-20一小時,-80過夜,液氮*保存。強烈建議液氮*保存,盡量不要在-80*保存,死亡率很高。
七、復(fù)蘇。調(diào)節(jié)水浴箱溫度為42℃,并提前在試管內(nèi)放置10倍培養(yǎng)液,使培養(yǎng)液溫度與室溫*。1分鐘內(nèi)融化細(xì)胞(禁止搖晃凍存管),移取至試管內(nèi),動作要輕,從試管管底開始慢慢上提移液管,使細(xì)胞在培養(yǎng)液內(nèi)分布均勻,離心,洗2次。