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大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA

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更新時(shí)間:2018-02-01 02:12:21瀏覽次數(shù):166次

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大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒
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Elisa試劑盒 是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)

大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA產(chǎn)品的用途:僅供科研究課題使用 
價(jià)格及詳細(xì)資料:電議,或咨詢?cè)诰€客服,或者以郵件形式發(fā)到我司qysw@qiyibio.com .齊一生物科技(上海)有限公司提供的ELISA試劑盒受到了廣大科研單位的*肯定和認(rèn)同。*保證,價(jià)格公道,傾力為國內(nèi)外科研院校實(shí)驗(yàn)室提供的產(chǎn)品。若有需要,我司將竭誠為您服務(wù)!
                 大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA本試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中含量。
實(shí)驗(yàn)原理:
   本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中該產(chǎn)品水平。用純化的本產(chǎn)品抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入本產(chǎn)品抗原,再與HRP標(biāo)記的本產(chǎn)品抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的本產(chǎn)品呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中該產(chǎn)品濃度。
試劑盒組成:
試劑盒組成    48孔配置    96孔配置    保存
說明書    1份    1份    
封板膜    2片(48)    2片(96)    
密封袋    1個(gè)    1個(gè)    
酶標(biāo)包被板    1×48    1×96    2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品:1800ng/L    0.5ml×1瓶    0.5ml×1瓶    2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液    1.5ml×1瓶    1.5ml×1瓶    2-8℃保存
酶標(biāo)試劑    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
樣品稀釋液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
顯色劑A液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
顯色劑B液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
終止液    3ml×1瓶    6ml×1瓶    2-8℃保存
濃縮洗滌液    (20ml×20倍)×1瓶    (20ml×30倍)×1瓶    2-8℃保存
標(biāo)本要求: 
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200 ng/L,800 ng/L ,400 ng/L,200ng/L, 100 ng/L)。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,使用排搶加樣。
4.請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),    
在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD      
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      
倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      
代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%     
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存;2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月

大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA其它產(chǎn)品PLC Module, CC-Link, DCU    9021081    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Tubing connectors, vac.pump v2.0, BR8000    9020929    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Needles 0.4x42mm (100), CX1    9020798    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
PCB, LED breakout, CAS    9020706    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Clamp, table, single sided, C42    9020700    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Panel, right, Cabinet Qsym    9020635    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Packaging (complete), C12    9020325    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Carrier, tubes, sample track, Qsym    9017659    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Upgrade Kit Varispan, TA align., BR UNIV    9017324    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
PCB, Mainboard, QXT    9020231    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Carton and Protective Foam, RGQ    9020182    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Accessory cable (15 pin, M/F), QXT    9020113    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Solenoid Switch, TLyser 2    9020092    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Transport Brace, TLyser    9020084    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Temp, Flex Circuit    9239517    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Retrofit, DeBubbler a/Level Sensor kit    9239497    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
EX Optics Platform, Uniphase    9239480    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Filter, Interference, 450nm    9232802    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Filter, Interference, 405nm    9232801    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Pump, Peristaltic, incl. 4 Tubes    9232895    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Tubing Set, Syringe Inlet, BR8 UNIV    9016645    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Tip Disposal Bags MDx(Set à 15 pcs.)    9016605    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Round Bucket Set (4), sealable    9016516    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Vacuum Tray, complete, BR8 RD    9016449    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Base Plate, Robovac, BR8 RD4.2 UTP    9016443    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Right Hand End Cap, Wash Head 8-fold    9016434    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
PCB, Turntable, X-Main    9016299    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Holder, tip rack, unit 6-fold    9011900    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Handle, HS shaker adapter plate, BR8000    9011779    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
PyroMark Q96 MD Software (5)    9019086    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
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Grid, UV lamp, EZ1xl    9019004    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Hinge, for door, EZ1xl    9019003    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
RBlock, 16x0.2ml PCR 8x2ml/1.5ml Flat/Ta    9018951    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Adapter, 33x2ml flat base Tubes    9018930    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Rotor-Gene AssayManager SOW(10 licenses)    9022739    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Retainer, PMT Baffle, DML3000    9022707    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Extension set (Z), 4 x 50mm, Pos. Sys.    9016027    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
Connecting Tool, Disp.Head, BR8 V2.0    9015911    qiagen    德國    齊一生物    1-2年
EZ1 FNSC Card    9015864    qiagen    德國    齊一生物    1-2年

 

 

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