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大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2021-12-23 09:18:54瀏覽次數(shù):187次

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大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中含量。
實(shí)驗(yàn)原理:
   本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中水平。用純化的本產(chǎn)品抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入本產(chǎn)品抗原,再與HRP標(biāo)記的大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒本產(chǎn)品抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的本產(chǎn)品呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中濃度。
試劑盒組成:
試劑盒組成    48孔配置    96孔配置    保存
說(shuō)明書    1份    1份    
封板膜    2片(48)    2片(96)    
密封袋    1個(gè)    1個(gè)    
酶標(biāo)包被板    1×48    1×96    2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品:1800ng/L    0.5ml×1瓶    0.5ml×1瓶    2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液    1.5ml×1瓶    1.5ml×1瓶    2-8℃保存
酶標(biāo)試劑    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
樣品稀釋液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
顯色劑A液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
顯色劑B液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
終止液    3ml×1瓶    6ml×1瓶    2-8℃保存
濃縮洗滌液    (20ml×20倍)×1瓶    (20ml×30倍)×1瓶    2-8℃保存
標(biāo)本要求: 
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200 ng/L,800 ng/L ,400 ng/L,200ng/L, 100 ng/L)。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,使用排搶加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),    
在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD      
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      
倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      
代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋      
倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%     
大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒保存條件及有效期:
1.試劑盒保存;2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月

代理品牌產(chǎn)品*        美國(guó)MP Biomedicals    500 g    齊一生物    Vanillin            121-33-5
*        美國(guó)MP Biomedicals    1 kg    齊一生物    Vanillin            121-33-5
*        美國(guó)MP Biomedicals    25 g    齊一生物    o-Vanillin            148-53-8
*        美國(guó)MP Biomedicals    500 g    齊一生物    o-Vanillin            148-53-8
麥角固醇        美國(guó)MP Biomedicals    1 g    齊一生物    Viosterol            57-87-4
麥角固醇        美國(guó)MP Biomedicals    5 g    齊一生物    Viosterol            57-87-4
麥角固醇        美國(guó)MP Biomedicals    25 g    齊一生物    Viosterol            57-87-4
維生素 B12        美國(guó)MP Biomedicals    1 g    齊一生物    Vitamin B12            68-19-9
維生素D3, 9,10-開環(huán)膽甾-5,7,10(19)-三烯-3beta-醇    02101224.2    美國(guó)MP Biomedicals    250 mg    齊一生物    Vitamin D3            67-97-0
維生素D3, 9,10-開環(huán)膽甾-5,7,10(19)-三烯-3beta-醇        美國(guó)MP Biomedicals    5 g    齊一生物    Vitamin D3            67-97-0
維生素D3, 9,10-開環(huán)膽甾-5,7,10(19)-三烯-3beta-醇        美國(guó)MP Biomedicals    100 g    齊一生物    Vitamin D3 Powder            67-97-0
氧雜蒽    0521981280    美國(guó)MP Biomedicals    100 g    齊一生物    Xanthene            92-83-1
黃嘌呤        美國(guó)MP Biomedicals    5 g    齊一生物    Xanthine            69-89-6
黃嘌呤氧化酶,來(lái)源于牛奶        美國(guó)MP Biomedicals    25 units    齊一生物    Xanthine Oxidase From Bovine Milk            9002-17-9
黃嘌呤氧化酶,來(lái)源于牛奶        美國(guó)MP Biomedicals    50 units    齊一生物    Xanthine Oxidase From Bovine Milk            9002-17-9
"2,3-雙(2-甲氧基-4-硝基-5-磺苯基)-2H-四唑-5-甲酰胺內(nèi)鹽 內(nèi)鹽 (XTT)
"        美國(guó)MP Biomedicals    100 mg    齊一生物    XTT            111072-31-2 
對(duì)二甲苯    02158696.5    美國(guó)MP Biomedicals    500 ml    齊一生物    p-Xylene            106-42-3
對(duì)二甲苯        美國(guó)MP Biomedicals    4 L    齊一生物    p-Xylene            106-42-3
對(duì)二甲苯        美國(guó)MP Biomedicals    1 L    齊一生物    p-Xylene            106-42-3
對(duì)二甲苯        美國(guó)MP Biomedicals    4x4 L    齊一生物    p-Xylene            106-42-3
對(duì)二甲苯        美國(guó)MP Biomedicals    6x1 L    齊一生物    p-Xylene            106-42-3
4-甲基酚        美國(guó)MP Biomedicals    100 g    齊一生物    p-Xylene            106-44-5
鄰甲酚    0520793580    美國(guó)MP Biomedicals    100 g    齊一生物    o-Xylene            95-48-7
鄰二甲苯    02158694.5    美國(guó)MP Biomedicals    500 ml    齊一生物    o-Xylene            95-47-6
鄰二甲苯        美國(guó)MP Biomedicals    4 L    齊一生物    o-Xylene            95-47-6
鄰二甲苯        美國(guó)MP Biomedicals    1 L    齊一生物    o-Xylene            95-47-6
鄰二甲苯        美國(guó)MP Biomedicals    6x1 L    齊一生物    o-Xylene            95-47-6
鄰二甲苯        美國(guó)MP Biomedicals    4x4 L    齊一生物    o-Xylene            95-47-6
二甲苯青FF    0521281710    美國(guó)MP Biomedicals    10 g    齊一生物    Xylene Cyanol FF            2650-17-1
木糖醇    0521991601    美國(guó)MP Biomedicals    1 g    齊一生物    D-Xylitol            87-99-0
木糖, 五碳醛糖        美國(guó)MP Biomedicals    100 g    齊一生物    D-(+)-Xylose            58-86-6
木糖, 五碳醛糖        美國(guó)MP Biomedicals    500 g    齊一生物    D-(+)-Xylose            58-86-6
木糖, 五碳醛糖        美國(guó)MP Biomedicals    1 kg    齊一生物    D-(+)-Xylose            58-86-6
溴化鋅        美國(guó)MP Biomedicals    100 g    齊一生物    Zinc Bromide            7699-45-8
溴化鋅        美國(guó)MP Biomedicals    500 g    齊一生物    Zinc Bromide            7699-45-8
氯化鋅        美國(guó)MP Biomedicals    100 g    齊一生物    Zinc Chloride, ACS            7646-85-7
氯化鋅        美國(guó)MP Biomedicals    500 g    齊一生物    Zinc Chloride, ACS            7646-85-7
氯化鋅        美國(guó)MP Biomedicals    1 kg    齊一生物    Zinc Chloride            7646-85-7
鋅礬,七水硫酸鋅    02199651.1    美國(guó)MP Biomedicals    100 g    齊一生物    Zinc Sulfate, U.S.P.            7446-20-0
酵母聚糖A,來(lái)源于釀酒酵母    02101237.2    美國(guó)MP Biomedicals    250 mg    齊一生物    Zymosan A            58856-93-2
酵母聚糖A,來(lái)源于釀酒酵母        美國(guó)MP Biomedicals    1 g    齊一生物    Zymosan A            58856-93-2
酵母聚糖A,來(lái)源于釀酒酵母        美國(guó)MP Biomedicals    5 g    齊一生物    Zymosan A            58856-93-2
A-萘酚    0520418901    美國(guó)MP Biomedicals    1 g    齊一生物    Α-Naphthol            90-15-3

 

 

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