大鼠神經(jīng)型NO合酶(nNOS）ELISA試劑盒使用范圍：僅供科研使用，不得用于臨床
本試劑僅供研究使用 目的：本試劑盒用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中含量。
實(shí)驗(yàn)原理：
   本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中水平。用純化的本產(chǎn)品抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入本產(chǎn)品抗原，再與HRP標(biāo)記的本產(chǎn)品抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的本產(chǎn)品呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中濃度。
試劑盒組成：大鼠神經(jīng)型NO合酶(nNOS）ELISA試劑盒
試劑盒組成    48孔配置    96孔配置    保存
說(shuō)明書(shū)    1份    1份    
封板膜    2片（48）    2片（96）    
密封袋    1個(gè)    1個(gè)    
酶標(biāo)包被板    1×48    1×96    2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品：1800ng/L    0.5ml×1瓶    0.5ml×1瓶    2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液    1.5ml×1瓶    1.5ml×1瓶    2-8℃保存
酶標(biāo)試劑    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
樣品稀釋液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
顯色劑A液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
顯色劑B液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
終止液    3ml×1瓶    6ml×1瓶    2-8℃保存
濃縮洗滌液    （20ml×20倍）×1瓶    （20ml×30倍）×1瓶    2-8℃保存
標(biāo)本要求： 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟：
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1200 ng/L，800 ng/L ，400 ng/L，200ng/L， 100 ng/L）。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排搶加樣。
4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
計(jì)算：
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，    
在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD      
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋      
倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值      
代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋      
倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%     
大鼠神經(jīng)型NO合酶(nNOS）ELISA試劑盒保存條件及有效期：
1.試劑盒保存；2-8℃。
2．有效期：6個(gè)月

代理品牌產(chǎn)品SignalSilence® p27 Kip1 siRNA II    12410S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    300µl    Cell Cycle / Checkpoint    美國(guó)    齊一生物    siRNA    -20C
PAX3 Antibody    12412S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Transcription Factors    美國(guó)    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
SignalSilence® UCHL1 siRNA II    12415S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    300µl    Protein Stability    美國(guó)    齊一生物    siRNA    -20C
CARD9 Antibody    12416S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    NF-kB Signaling    美國(guó)    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
CK1δ Antibody    12417S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Neuroscience    美國(guó)    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
TFF1/pS2 Antibody    12419S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Adhesion    美國(guó)    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
NLRC4 (D5Y8E) Rabbit mAb    12421S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Innate Immunity    美國(guó)    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
HNF1α Antibody    12425S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Metabolism    美國(guó)    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
IL-1β (D4T2D) Rabbit mAb (Mouse Specific)    12426S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    NF-kB Signaling    美國(guó)    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
Epitope Tag Alexa Fluor® 488 Conjugated Antibody Sampler Kit    12427S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    1Kit    Companion Products    美國(guó)    齊一生物    Antibody Sampler Kit    4C
Phospho-Smad1/5 (Ser463/465) (D5B10) Rabbit mAb (PE Conjugate)     12428S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    TGF-beta/Smad Signaling    美國(guó)    齊一生物    Monoclonal Antibody    4C
Phospho-Src (Ser17) (D7F2Q) Rabbit mAb    12432S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Tyrosine Kinase / Adaptors    美國(guó)    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
Phospho-Bim (Ser77) (D4H12) Rabbit mAb    12433S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Apoptosis    美國(guó)    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
Keratin 17/19 (D4G2) XP® Rabbit mAb    12434P    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    40µl    Cytoskeletal Signaling    美國(guó)    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
Keratin 17/19 (D4G2) XP® Rabbit mAb    12434S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Cytoskeletal Signaling    美國(guó)    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
FIP200 (D10D11) Rabbit mAb    12436S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Autophagy Signaling    美國(guó)    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
Phospho-DARPP-32 (Thr34) (D27A4) Rabbit mAb    12438S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Neuroscience    美國(guó)    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
CD82 (D7G6H) Rabbit mAb    12439S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    CD Markers    美國(guó)    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
SignalSilence® MAML1 siRNA II    12440S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    300µl    Development    美國(guó)    齊一生物    siRNA    -20C
S5a/PSMD4 (D20B2) Rabbit mAb    12441S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Protein Stability    美國(guó)    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
SignalSilence® MKK7 siRNA I (Mouse Specific)    12442S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    300µl    MAPK Signaling    美國(guó)    齊一生物    siRNA    -20C
MTMR3 Antibody    12443S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Autophagy Signaling    美國(guó)    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
PGRMC1 Antibody    12444S    美國(guó)Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Metabolism    美國(guó)    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C