豬血管細(xì)胞粘附分子-1( VCAM-1)ELISA 試劑盒
規(guī)    格：96T/48T
檢測標(biāo)本：血清，血漿，尿液，胸腹水，腦脊液，細(xì)胞培養(yǎng)上清，組織勻漿等
檢測方法：ELISA
檢測類型：酶聯(lián)免疫夾心法
產(chǎn)品的用途：僅供科研究課題使用

FOR RESEARCH USE ONLY

Drug Names

Generic Name：豬血管細(xì)胞粘附分子-1( VCAM-1)ELISA 試劑盒

      This kit can be used for determination of serum, plasma and liquid samples Organization Content.

The experimental principle:

The product levels were measured in samples of the kit by double antibody sandwichmethod. The product with the purified antibody coated microtiter plate, made of solid phase antibody, to package is the product antigen monoclonal antibodies are then added to the micropores, the product and then with HRP labeled antibody binding, the formation of antibody - antigen - antibody complex enzyme label, after thorough washing with TMB chromogenic substrate. TMB in the HRP enzyme catalytic conversion into the blue, and in the action of acid into the final yellow. This product is positively related to the depth of color and in the samples. Instrument measured absorbance in the 450nm wavelength with ELISA (OD), the product concentration in the samples was calculated by standard curve.

Materials provided with the kit

Specimen requirements

• serum- coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• plasma-use suited EDTA or citrate plasma as an anticoagulant,mix 10-20 mins ,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.
• cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,detect the composition of cells, Dilut cell suspension with PBS（PH7.2-7.4）, Cell concentration reached 1 million / ml, repeated freeze-thaw cycles, damage cells and release of intracellular components, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）, Rapidly frozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃ after melting,add PBS（PH7.4）, Homogenized by hand or Grinders, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant.
• extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.
• Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.

Assay procedure

1.Dilute and add sample to Standard: set 10 Standard wells on the ELISA plates coated, add Standard 100μl to the first and the second well, then add Standard dilution 50μl to the first and the second well, mix; take out 100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separay. then add Standard dilution 50μl to the third and the forth well ,mix ; then take out 50μl from the third and the forth well discard, add 50μl to the fifth and the sixth well ,then add Standard dilution 50μl to the fifth and the sixth well, mix ; take out 50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well, then add Standard dilution 50μl to the seventh and the eighth well ,mix ; take out 50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well, add Standard dilution 50μl to the ninth and the tenth well, mix , take out 50μl from the ninth and the tenth well discard(add Sample 50μl to each well after Diluting ,(density: 240ng/L,160ng/L ,80ng/L,40ng/L, 20ng/L)

2.add sample：Set blank wells separay (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.

3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.

4.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold)wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.

5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.

6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well. 

7.incubate：Operation with 3.

8.washing：Operation with 5.

9.color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃

10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).

11.assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.

豬血管細(xì)胞粘附分子-1( VCAM-1)ELISA 試劑盒Important notes

• The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in the room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.
• washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve when dilute . Washing does not affect the result.
• add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids the experimental error. add sample within 5 mins, if the number of sample is much , recommend to use Volley .
• if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the first standard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.
• Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.
• The substrate evade the light preservation.
• Please according to use instruction strictly, The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard.
• All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material process.
• Do not mix reagents with those from other lots.

豬血管細(xì)胞粘附分子-1( VCAM-1)ELISA 試劑盒Calculate：

Take the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.

豬血管細(xì)胞粘附分子-1( VCAM-1)ELISA 試劑盒Storage and validity

1．Storage：  2-8℃.

2．validity： six months.

豬血管細(xì)胞粘附分子-1( VCAM-1)ELISA 試劑盒其他產(chǎn)品

系列產(chǎn)品    規(guī)格
1.不孕不育系列（7項）    
1.抗精子（ASA）    48T／96T
2.抗心磷脂（EMAB）    48T／96T
3.抗卵巢（AOAB）    48T／96T
4.抗子宮（ACL）    48T／96T
5.抗絨毛促性腺激素（HCG）    48T／96T
6.抗滋養(yǎng)（TA）    48T／96T
7.抗透明帶（ZP）    48T／96T
2.優(yōu)生優(yōu)育系列（5項）    
1.弓形蟲（TOXO）    48T／96T
2.風(fēng)疹(RUb)    48T／96T
3.巨細(xì)胞（CMV）    48T／96T
4.單皰Ⅰ（HSV-Ⅰ）    48T／96T
5.單皰Ⅱ（HSV-Ⅱ）    48T／96T
3.糖尿病系列（5項）    
1.胰島素自身抗體（IAA）    48T／96T
2.胰島細(xì)胞抗體(ICA)    48T／96T
3.抗谷氨酸脫羧酶抗體（GAD）    48T／96T
4.瘦素    48T／96T
5.C肽    48T／96T
4.自身免疫系列（4項）    
1.抗風(fēng)濕因子（RF）    48T／96T
2.抗核抗體（ANA）    48T／96T
3.抗雙鏈DNA抗體（ds-DNA）    48T／96TRecombinant Human beta-NGF    Peprotech    5ug/20ug/    支
Recombinant Murine β-NGF    Peprotech    5ug/20ug/    支
Recombinant Human BMP-2    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Murine EGF    Peprotech    100ug/500ug/    支
Recombinant Human EGF    Peprotech    100ug/500ug/    支
Recombinant Human FGF-acidic    Peprotech    50ug/1mg    支
Recombinant Human FGF-acidic    Peprotech    10ug/50ug/    支
Recombinant Murine FGF-acidic    Peprotech    10ug/50ug/    支
Recombinant Human FGF-basic    Peprotech    50ug/1mg    支
Recombinant Human FGF-basic    Peprotech    10ug/50ug/    支
Recombinant Murine FGF-basic    Peprotech    10ug/50ug/    支
Recombinant Murine G-CSF    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human G-CSF    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human GM-CSF    Peprotech    10ug/1mg/    支
Recombinant Human GM-CSF    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Murine GM-CSF    Peprotech    10ug/1mg/    支
Recombinant Murine GM-CSF    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human HGF    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human IFN-r    Peprotech    20ug/100ug/    支
Recombinant Murine IFN-r    Peprotech    20ug/100ug/    支
Recombinant Human IGF-1    Peprotech    100ug/1mg    支
Recombinant Human IGF-1    Peprotech    20ug/100ug/    支
Recombinant Murine IGF-1    Peprotech    10ug/50ug/    支
Recombinant Human KGF    Peprotech    10ug/1mg/    支
Recombinant Human KGF(FGF-7)    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human IL-1α    Peprotech    5ug/25ug/    支
Recombinant Murine IL-1a    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human IL-1β    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Murine IL-1β    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human IL-2    Peprotech    50ug/1mg    支
Recombinant Human IL-2    Peprotech    10ug/50ug/    支
Recombinant Murine IL-2    Peprotech    5ug/20ug/    支
Recombinant Human IL-3    Peprotech    10ug/1mg/    支
Recombinant Human IL-3    Peprotech    5ug/25ug/    支
Recombinant Murine IL-3    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human IL-4    Peprotech    10ug/1mg/    支
Recombinant Human IL-4    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Murine IL-4    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Murine IL-6    Peprotech    5ug/20ug/    支
Recombinant Human IL-6    Peprotech    5ug/20ug/    支
Recombinant Human IL-10    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Murine IL-10    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human IL-11    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Murine IL-11    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human IL-12    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Murine IL-12    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human IL-13    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Murine IL-13    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human IL-15    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Murine IL-15    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human IL-17    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Murine IL-17    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human TNF-a    Peprotech    10ug/50ug/    支
Recombinant Murine TNF-a    Peprotech    5ug/20ug/    支
Recombinant Human VEGF165    Peprotech    10ug/1mg/    支
Recombinant Human VEGF165    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Murine VEGF    Peprotech    2ug/10ug/    支
Recombinant Human EPO    Prospec    5ug/50ug    支
Recombinant Human HGH    Prospec        支
Recombinant Human IFN-α2a    Prospec    20ug/100ug/    支
Recombinant Human IFN-α2b    Prospec    20ug/100ug/    支
*部分 生化試劑            
產(chǎn)品名稱    產(chǎn)地    規(guī)格    單位
熊果酸（標(biāo)準(zhǔn)品）    biotopped    250mg    支
Y-球蛋白     Sigma    1g    瓶
乙酰輔酶A    sigma    5mg    支
人血清白蛋白    sigma    1g    支
Y-氨基丁酸    sigma    10g    支
Fibronectin 人纖維連接蛋白（Fn）    sigma    1mg    支
Laminin層粘連蛋白    sigma    1mg    支
Albumin Bovine 牛血清白蛋白(全組分 )    Sigma    5g    瓶
Albumin BovineⅤ  牛血清白蛋白Ⅴ    Roche    5g    瓶
Albumin BovineⅤ  牛血清白蛋白Ⅴ    Roche    100g    瓶
Adenosine 腺苷    Amresco    5g    瓶
Actinomycin D   放線菌素D    Sigma    1mg    瓶

4.抗環(huán)瓜氨酸肽抗抗體CCP    48T／96T
5.肝纖維化系列（4項）    
1.透明質(zhì)酸（HA）    48T／96T
2.層粘連蛋白(LN)    48T／96T
3.Ⅲ型前膠原肽（PCⅢ）    48T／96T
4.Ⅳ型前膠原（Ⅳ-C）    48T／96T
    
6.呼吸道，性病系列    
1.肺炎支原體（MP-Ab）    48T／96T
2.CP    48T／96T
3.其它產(chǎn)品及TB    48T／96T
7.輪狀病毒抗體（RV-Ag）    48T／96T