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所 在 地上海市
更新時間:2021-12-23 09:15:48瀏覽次數(shù):148次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線小鼠骨髓瘤細胞SP2/0-S產(chǎn)品運輸方式:干冰或者活體細胞運輸,本公司會保證細胞運輸中的存活率本公司細胞株低價保證質(zhì)量,免費快遞直達。本公司擁有的專業(yè)細胞培養(yǎng)技術(shù)人員為您的細胞培養(yǎng)準備詳細的技術(shù)咨詢。齊一生物科技(上海)有限公司:。Web:www.qiyibio。。com
小鼠骨髓瘤細胞SP2/0-S細胞培養(yǎng)方法
1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右,讓細胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
5 、24小時后,細胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的*消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經(jīng)驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度 5%CO2 培養(yǎng)
7. 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當(dāng)方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素)、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或*/*(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
1000ul盒裝藍色吸頭 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
1000ul盒裝滅菌藍色吸頭 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
1000ul袋裝透明吸頭 1000 Tips / 包, 5 包 / 箱
1000ul透明低吸附吸頭 1000 Tips / 包, 5 包 / 箱
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10ml透明吸頭 200 Tips / 包, 10 包 / 箱
1200ul Universal Fit Pipet Tips. 1000 Tips / 包, 5 包 / 箱
1200ul Universal Fit Pipet Tips 96支 / 盒,12 盒 / 包, 3 包 / 箱
1200ul Pre-Sterilized Universal Fit Pipet Tips 96支 / 盒, 12 盒 / 包, 3 包 / 箱
12 x 75 mm Polypropylene Culture Tube 500 tubes / 包, 2 包 / 箱
12 x 75 mm Polystyrene Culture Tube. 500 tubes / 包, 2 包 / 箱
13 x 100 mm 聚丙烯試管 250 Tubes / 包, 4 包 / 箱
13x100mm Polystyrene Culture Tube 250 Tubes / 包, 4 包 / 箱
30ul Maxymum Recovery Pipet Tips., Clear 384支 / 盒, 5 0盒 / 箱
30ul Pre-Sterilized Maxymum Recovery Pipet Tips., Clear 384支 / 盒, 5 0盒 / 箱
30ul Pipet Tips, Racked, Clear 384支 / 盒, 5 0盒 / 箱
30ul Pre Sterilized Pipet Tips., Clear 384支 / 盒, 5 0盒 / 箱
200ul 透明吸頭 1000 Tips / 包, 20 包 / 箱
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200ul 疊裝低吸附透明吸頭 5 小疊 / 盒, 10 盒 / 箱
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200ul 盒裝透明吸頭 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
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0.5-10ul 透明低吸附Gilson吸頭 1000 Tips / 包, 20 包 / 箱
0.5-10ul 盒裝透明低吸附Gilson吸頭 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
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300ul透明吸頭 1000 Tips / 包, 10 包 / 箱
300μl低吸附透明吸頭 1000 Tips / 包, 10 包 / 箱
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0.5-10ul透明Eppendorf吸頭 1000 Tips / 包, 20 包 / 箱
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0.5-10ul盒裝滅菌透明低吸附Eppendorf吸頭 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
0.5-10ul盒裝透明Eppendorf吸頭 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
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1000-5000ul透明吸頭 250 Tips / bag, 10 bags / 箱
1000ul Blue Tips Compatible With Eppendorf and Socorex Pipettors. 500 Tips / 包, 10 包 / 箱
1000ul Maxymum Recovery Blue Tips Compatible With Eppendorf and Socorex Pipettors. 500 Tips / 包, 10 包 / 箱
1000ul Blue Tips Compatible With Eppendorf and Socorex Pipettors. 96支 / 盒, 12 盒 / 包,3 包 / 箱
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200ul Yellow Tips Compatible With Eppendorf Pipettor. 1000 Tips / 包, 10 包 / 箱
200ul Maxymum Recovery Yellow Tips Compatible With Eppendorf Pipettor 500 Tips / 包, 20 包 / 箱
200ul Maxymum Recovery Yellow Tips Compatible With Eppendorf Pipettor 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
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100ul透明濾芯吸頭 1000 Tips / 包, 10 包 / 箱
1000ul透明濾芯吸頭 1000 Tips / 包, 5 包 / 箱
1000ul Maxymum Recovery Universal Fit Filtered Pipet Tips. 1000 Tips / 包, 5 包 / 箱
1000ul盒裝滅菌透明低吸附濾芯槍頭 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
1000ul盒裝滅菌透明濾芯槍頭 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
1000ul Pre-Sterilized Maxymum Recovery Clear Wide Bore Pipet Tips. 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
1000ul Pre-Sterilized Clear Wide Bore Pipet Tips. 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
100ul Maxymum Recovery Filtered Pipet Tips for Pipetman P100. 1000 Tips / 包, 10 包 / 箱
100ul盒裝滅菌低吸附透明濾芯槍頭 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
100ul盒裝滅菌透明濾芯槍頭 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
1100ul Pre-Sterilized Maxymum Recovery Universal Fit Filtered Pipet Tips 96支 / 盒, 12 盒 / 包,3 包 / 箱
1100ul Pre-Sterilized Universal Fit Filtered Pipet Tips 96支 / 盒, 12 盒 / 包,3 包 / 箱
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150ul盒裝滅菌低吸附透明濾芯槍頭 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
150ul盒裝滅菌透明濾芯槍頭 96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
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