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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2015-11-17 11:40:56瀏覽次數(shù):113次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線人胸腺激酶缺陷性細胞系143TK齊一生物科技有限公司自成立以來我們一直從事ScienCell和美國ATCC細胞以及菌株等產(chǎn)品的銷售工作,對產(chǎn)品知識更多了解,對產(chǎn)品性能把握更準(zhǔn)確。.齊一生物科技(上海)有限公司:.Web:www.qiyibio。。com
人胸腺激酶缺陷性細胞系143TK一、細胞操作參考書
二、生長特性:貼壁 懸浮
三、細胞生長條件:
培養(yǎng)基 90% (GIBCO)
血清 10% FBS(GIBCO)
溫度 37℃
空氣條件 5% CO2,,95% AIR
生長代數(shù) P4
凍存條件 培養(yǎng)基70%、血清20%、DMSO10%
四、組成:
組份 規(guī)格
細胞一瓶 T25
細胞培養(yǎng)與操作說明 1份
五、細胞接收后的操作流程與注意事項
1.如果細胞為貼壁細胞,,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增殖而是繼續(xù)脫落死亡,請及時實驗室,技術(shù)人員會跟進解決
2.貼壁細胞生長緩慢:適當(dāng)提高血清濃度(zui高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
3.生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
六、細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?-2min)
2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让福?~8ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
3.取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存
特別注意:(如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))
1.收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間zui長不宜超過72小時)
2.貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細胞放置培養(yǎng)箱孵育過夜到第二天再做消化傳代
如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并實驗室
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