牛親環(huán)素B(CYPB)ELISA試劑盒本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中待測物質(zhì)水平。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì)，再與HRP標記的抗原抗體結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標抗原復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中待測物質(zhì)的濃度。 
注意事項：牛親環(huán)素B(CYPB)ELISA試劑盒標本的處理：

（1）細胞培養(yǎng)上清液 根據(jù)需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。

（2）腦脊液 根據(jù)需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是5倍。

（3）血漿 ①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分鐘，4℃，分離血漿樣品，然后儲存在零下80℃直到使用。②用試劑盒中的標準稀釋液5倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質(zhì)影響檢測，按照說明書方法檢測。

分析原理：牛親環(huán)素B(CYPB)ELISA試劑盒是基于標準的雙抗夾心酶聯(lián)免疫分析技術(shù)。將人腫瘤 壞死因子受體超家族成員B特異性抗體包被于96孔板中人腫瘤壞死因子受體超家族成員B的檢測抗體為生 物素標記抗體試驗樣品和生物素標記的檢測抗體相繼加入到96孔中，然后洗滌平板。生物素-HRP加入96 孔中，未與生物素標檢測抗體結(jié)合的，被洗滌緩沖液洗掉HRP的底物TMB可與HRP（辣根過氧化物酶）發(fā)生 酶促反應。TMB被HRP催化后變成藍色物質(zhì)，在加入酸性終止液后變?yōu)辄S色。黃顏色的深淺與人腫瘤壞死因 子受體超家族成員B樣品被捕獲的量成正比。

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