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實驗細(xì)節(jié):酶標(biāo)板穩(wěn)定性的判斷

時間:2017-11-1閱讀:2715
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實驗細(xì)節(jié):酶標(biāo)板穩(wěn)定性的判斷

酶標(biāo)板作為ELISA檢測實驗中的輔材,起著舉足輕重的作用并直接影響zui終實驗結(jié)果,酶標(biāo)板的好壞主要取決于其對蛋白吸附的靈敏度、板孔間蛋白吸附能力差異以及所采購酶標(biāo)板批次間的差異。因此,選擇一款蛋白吸附靈敏度高、對蛋白吸附能力孔間差異小、批次間差異小的酶標(biāo)板產(chǎn)品,是實驗者獲得可靠、穩(wěn)定實驗結(jié)果的保障。

根據(jù)孔數(shù),可分為96孔、48孔等,由于酶標(biāo)板主要是配合酶標(biāo)儀用,目前市面上的酶標(biāo)儀zui多為96孔,因此酶標(biāo)板zui為常用的也是96孔。

酶標(biāo)板性能判斷:

良好的酶標(biāo)板應(yīng)該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間、同一板各孔之間性能相近。酶標(biāo)板由于原料的不同和制作工藝的差別,各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大,因此,每一批號的酶標(biāo)板在使用前須事先檢查其性能。

常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔,洗滌后每孔內(nèi)加入適當(dāng)稀釋度的酶標(biāo)抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應(yīng)后,分別測每孔溶液的吸光度。控制反應(yīng)條件,使各孔讀數(shù)在吸光度0.8左右。計算全部讀數(shù)的平均值。所有單個讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差,應(yīng)小于10%。

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