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α-干擾素聯(lián)合全反式維甲酸逆轉(zhuǎn)人白血病細(xì)胞K562/ADM耐藥性的研究

時間:2018/6/21閱讀:2137
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α-干擾素聯(lián)合全反式維甲酸逆轉(zhuǎn)人白血病細(xì)胞K562/ADM耐藥性的研究

探討α-干擾素(interferon-α,IFN-α)和全反式維甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)聯(lián)合作用對耐藥白血病細(xì)胞K562/ADM耐藥性逆轉(zhuǎn)效應(yīng)及其作用機(jī)制。方法采用CCK-8法檢測逆轉(zhuǎn)劑IFN-α和ATRA的細(xì)胞毒性及藥物作用后的逆轉(zhuǎn)倍數(shù);流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期;RT-PCR法檢測細(xì)胞PI3K/Akt通路中PI3K、Akt、Bad基因的表達(dá);Western blot法檢測PI3K、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、Bad蛋白的表達(dá)。結(jié)果 K562/ADM細(xì)胞對多柔比星(adriamycin,ADM)的耐藥率達(dá)54倍,ADM分別與IFN-α、ATRA或聯(lián)合應(yīng)用時可逆轉(zhuǎn)K562/ADM細(xì)胞對ADM的耐藥倍數(shù)分別為1.24、2.34、8.14;應(yīng)用ADM 4 mg·L-1單用或聯(lián)合IFN-α2.5×106U·L-1、ATRA 7.5μmol·L-1(無毒性濃度)均可使K562/ADM細(xì)胞的凋亡率明顯增加,細(xì)胞周期被阻滯在G0/G1期;PI3K基因及蛋白表達(dá)均明顯下調(diào),Akt基因及蛋白無明顯變化,Bad基因及蛋白表達(dá)均上調(diào),p-Akt蛋白表達(dá)下降,當(dāng)兩藥聯(lián)用時上述表達(dá)更明顯。結(jié)論 IFN-α聯(lián)合ATRA能逆轉(zhuǎn)K562/ADM細(xì)胞多藥耐藥,其機(jī)制可能是抑制了PI3K/Akt通路的作用。

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