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Millipore ZipTip微量層析柱你了解多少?

時(shí)間:2020/12/28閱讀:7329
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Millipore ZipTip微量層析柱---為MALDI-ToF MS濃縮和純化樣品

概述

ZipTip的優(yōu)點(diǎn)

  • 一步脫鹽、濃縮和純化
  • 分級分離復(fù)雜樣品,以獲得更有意義的數(shù)據(jù)
  • 適合肽、核酸和其他樣品的理想工具
  • 無滯留體積,z大化回收
  • 省卻了耗時(shí)的色譜分析

ZipTip是一種10 µL微量層析柱,配有0.6或0.2 µL色譜培養(yǎng)基柱床,固定于其末端,無滯留體積。是為了敏感的下游分析進(jìn)行樣品濃縮和純化的理想工具。

下面是可以用ZipTip樣品制備加以改善的一些分析舉例:

  • 質(zhì)譜
  • HPLC(高性能液相光譜)
  • 毛細(xì)管電泳
  • 原子吸收光譜

ZipTip微量層析柱簡單易用。

  • 將微量層析柱裝到單通道或多通道移液器、標(biāo)準(zhǔn)22口徑鈍端HPLC針、或兼容的自動(dòng)移液/樣品制備站上。
  • 吸取和分配培養(yǎng)基數(shù)次以進(jìn)行樣品結(jié)合。
  • 用類似方法,吸取和分配適當(dāng)?shù)那逑慈芤?,以去除污染物?/li>
  • 將濃縮、純化后的樣品洗提到1–4 µL相容溶劑中,然后直接移液到質(zhì)譜分析、小杯或其他分析步驟。

對于要求更小的洗提體積的應(yīng)用(例如<1 µL),我們還提供含有0.2 µL培養(yǎng)基的微量柱床。

ZipTip微量層析柱為濃縮和純化飛克摩爾至皮摩爾的肽、蛋白和寡核苷酸提供了再現(xiàn)性和回收率z越的方法,使分析數(shù)據(jù)更好。要想進(jìn)一步簡化分析,您還可以通過分步洗提來分級分離復(fù)雜的肽混合物。

性能

 

ziptip

有3種不同的ZipTip樹脂可供選擇:

樹脂相容分析物
C18樹脂(0.6 µL或0.2 µL柱床容積)寡核苷酸或小蛋白(<50 kDa)/肽水溶液
C4樹脂蛋白或肽(3 kDa – 100 kDa)水溶液
強(qiáng)陽離子交換樹脂(SCX)含有有機(jī)溶劑或除垢劑的肽溶液

ZipTip®微量層析柱是一種10 µL層析柱,配有0.6或0.2 µL色譜培養(yǎng)基柱床,固定于其末端。其特別適合為敏感的分析(例如MALDI-ToF MS)濃縮和純化樣品。ZipTip®微量層析柱為濃縮和純化飛克摩爾至皮摩爾的肽、蛋白和寡核苷酸提供了再現(xiàn)性和回收率z越的方法,使分析數(shù)據(jù)更好。要想進(jìn)一步簡化分析,您還可以通過分步洗提來分級分離復(fù)雜的肽混合物。

規(guī)格

材料
微量層析柱聚丙烯
C18 和µ-C18 樹脂硅珠,15 µm,200 Å孔徑
C4樹脂硅珠,15 µm,300 Å孔徑
SCX樹脂強(qiáng)陽離子交換樹脂,12 µm,300 Å孔徑
體積,µL
微量層析柱10 µL
樹脂柱床0.2或0.6
容量
ZipTipC18當(dāng)分析物達(dá)到飽和時(shí),通常為5 µg
ZipTipµ-C18當(dāng)分析物達(dá)到飽和時(shí),通常為2.0 µg
ZipTipC4當(dāng)分析物達(dá)到飽和時(shí),通常為3.3 µg
尺寸
Tip 長度31 mm
Tip 內(nèi)徑 (頂)3.375 mm
Tip 外徑 (頂)5.8 mm
溫度4至70 °C
pH 范圍pH1.5 – pH13.5;當(dāng)24小時(shí)接觸時(shí),為pH2 – pH12

推薦的配套設(shè)備

手動(dòng)移液:
ZipTip微量層析柱適配大多數(shù)10 µL單通道移液器。如要同時(shí)處理8個(gè)樣品,建議使用Biohit Proline® 多通道電子移液器。
自動(dòng)移液:
ZipTip微量層析柱還可配用多種自動(dòng)移液系統(tǒng),包括:

  • 用于Biospectrometry™ 的ABI SymBiot® 樣品工作站(ABI貨號:GEN602987),配有適合ZipTip微量層析柱通用錐尖和適合ZipTip盒子的支架適配器
  • 基因組溶液ProMS™ 樣品制備站
  • Bruker Daltonics MAP™ II 和 II/8 MALDI AutoPrep系統(tǒng),配有適合ZipTip盒子的支架適配器(密理博貨號:ST0B DAP TR)
  • Tecan GENESIS工作站
  • CyBio CyBi™-96孔自動(dòng)移液器

 脫鹽步驟

(1)用50%ACN中性溶液活化Millipore C18 ZipTip. 吸排5~10次。
(2)用0.1% 甲酸溶液平衡C18 ZipTip。 吸排除5~ 10次。」
(3)用2 ul 0.1%甲酸溶解酶切產(chǎn)物,用C18 ZipTip 吸附肽段。吸排5~10次。
(4)用0.1%甲酸溶液洗鹽。吸排2~3次。
(5)吸取4ul含0.1% 甲酸的50%ACN溶液洗脫肽段供質(zhì)譜分析。在空樣品管①中吸排5~10次。
(6)吸取4ul含0.1%甲酸的70%ACN溶液洗脫肽段供質(zhì)譜分析。在空樣品管②中吸排5~10次。
(7)用70%ACN中性溶液吸排5~10次,洗凈ZipTip柱。

特別注意事項(xiàng):樣品中不應(yīng)該含有機(jī)溶劑

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