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賽多利斯超濾離心管你知道嗎?

時間:2019/10/9閱讀:2552
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賽多利斯超濾離心管

超濾
超濾是通過超濾膜實現(xiàn)的;這種膜具有方向異性,表現(xiàn)為表層致密,深層疏松的特點;根據(jù)超濾膜本身的孔徑,可以分離相應的大分子和溶劑。在超濾的過程中,溶劑和鹽類透過超濾膜,而大分子則因為被截留而得到濃縮。并且超濾還可以用來進行溶劑置換。通過多次的濃縮和添加目標溶劑,就可以逐步完成目標溶劑的替換,從而取代了冗長的透析步驟。盡管超濾并非分離/分餾不同大分子的標準方法,但在某些情況下仍可以運用,如不同大分子的分子量相差至少10倍以上。
超濾是一種溫和的方法,不會引起大分子的變性,因此比其他的方法更加有效,適應面更廣。
超濾的方法:
賽多利斯提供了各種各樣的超濾方法,供您在濃縮生物學樣品時使用。下面列舉了超濾產(chǎn)品的選型指南,您可以結(jié)合樣品體積,可用的設備,以及期望的超濾速度和過程控制等因素來選擇適合的產(chǎn)品
 

-離心濃縮:
(處理體積:100ul-100ml)
過膜壓力由離心力提供,在離心力的作用下,溶劑和小分子的物質(zhì)將通過超濾膜,進入下游濾出液收集器中。這是一個溫和的過程,可快速裝配,并且比多數(shù)其他方法實現(xiàn)更快的過濾速度。
賽多利斯提供了多種產(chǎn)品,包括7種vivaspin®系列產(chǎn)品,2種vivacell®產(chǎn)品和1種centroSart®I,這些產(chǎn)品可用于蛋白濃縮,同時也有vivacon®系列產(chǎn)品用于DNA濃縮和多肽的濃縮與分離。
 

-加壓超濾
(處理體積:5ml-250ml)
過膜壓力過膜壓力由壓縮空氣或壓縮惰性氣體提供。為了得到快的超濾效果,加壓后的vivacell®產(chǎn)品可以放置在實驗室搖床上。搖床的震蕩,避免了大分子沉積在膜表面形成的濃差極化現(xiàn)象,從而維持了超濾流速。Vivaspin®20,Vivacell® 70, Vivacell® 100 and Vivacell® 250這四種產(chǎn)品可以帶
壓使用。
加壓離心是賽多利斯*的超濾方式,該方式集合了加壓超濾和離心超濾的優(yōu)點,因此超濾的速度在所有方法中快。
通常,該方法比離心的方法要快30%-50%。Vivaspin®20和Vivacell®70可以進行加壓離心的操作(初始體積:5-50ml)。
 

-切向流
(處理體積:100ml-5L)
在蠕動泵的作用下,樣品流經(jīng)超濾膜,又回流到樣品容器中;在切向流設備的回流出口位置安裝限流裝置,以此提高超濾膜表面受到的壓力;此時,超濾膜受到的切向壓力就是過膜壓力。在過膜壓力的作用下,溶劑和小分子的物質(zhì)穿過超濾膜進入到濾出液收集容器中。可重復使用的Vivaflow® 50R和
Vivaflow®200以及一次性使用的Vivaflow®50,是目前市面上專門為實驗室應用而設計開發(fā)的切向流超濾膜包。

-靜態(tài)吸附
(初始體積:3ml-20ml)
這種技術(shù),是在超濾膜的后方填充強吸附性的纖維素,在這些纖維素的吸附作用下,溶劑和小分子的物質(zhì)透過超濾膜被吸收,從而使被截留的大分子得到濃縮,并集中在了樣品池的底部;在這里,纖維素的吸附力提供了過膜壓力。這種方法不需要任何其他的設備,因此是臨床應用的理想選擇,例
如,在進一步分析之前,對尿液進行濃縮。靜態(tài)吸附的產(chǎn)品有Vivapore®5和and Vivapore®20可供選擇。

超濾的典型應用

  • -濃縮/脫鹽、適用于蛋白、酶類、DNA、單克隆抗體、免疫球蛋白、病毒和納米顆粒
  • -在毛細管電泳之前,對尿液中本周氏蛋白(Bence Jones Protein,BJP)進行濃縮
  • -司法鑒定中,在鏈式反應之前,對DNA進行濃縮
  • -基于濾膜的樣品制備(filter-based sample preparation,FASP)-多肽的分離
  • -游離型藥物/激素的分析
  • -從PCR擴增后的DNA中去除引物;
  • -去除標記氨基酸和標記核苷酸
  • -去除樣品中的蛋白質(zhì)
  • -實驗室常規(guī)的濃縮和脫鹽、包括蛋白、酶類、DNA、生物分子、病毒、抗體和免疫球蛋白

Process Optimization
超濾過程的優(yōu)化
某些情況下,必須追求zui高的回收率,例如,目標溶質(zhì)處于微克級別,賽多利斯推薦您考慮如下措施來獲得*的超濾效果:

  • -根據(jù)目標分子量,選擇盡量低的MWCO。為得到zui高的回收率,MWCO應至少在目標溶質(zhì)分子量的一半以下;
  • -避免過度濃縮。終體積越小,就越難以達到*的回收率。如果可行,在初濃縮之后,使用一滴或數(shù)滴緩沖液沖洗濃縮裝置,再進行回收;
  • -對超濾裝置進行預處理;使用蒸餾水配制鈍化溶液,例如5%的SDS,Tween 20 或Triton X,將超濾裝置浸泡過夜,使用前*清洗即可使用。

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