亚洲国产精品二区久久,日本美女后入式午夜视频在线观看,国产污视频在线观看,欧美日韩国产精品中文字幕在线观看

上海必泰生物科技有限公司
初級會員 | 第10年

18621924707

Millipore 密理博
日本東洋Advantec
PALL頗爾
Whatman沃特曼
雙圈濾紙
Whatman沃特曼診斷產(chǎn)品
Aisimo愛西默
實驗耗材類
Qiagen凱杰
Sartorius賽多利斯
德國MN
伯樂BIO-RAD
細胞庫

如何選擇合適的pall離心(濃縮)管?

時間:2019/4/17閱讀:4970
分享:

(1)選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。

(2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量*過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。

(3)平衡。質(zhì)量和重心二者都要達到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預(yù)冷至4度)。不同離心機的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后,有所不同。離心機的加速度調(diào)至zui低檔,減小對膜的壓力。注意,一定要等離心機達到目的轉(zhuǎn)速之后,方可離開離心機,否則離心機出問題時,無法*時間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整(角轉(zhuǎn)離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。

(4)當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。

(5)前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經(jīng)0.22um超濾膜超濾),再 濃縮至1ml左右,連續(xù)三次,zui后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定,一般不多于500ul,也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。

離心濃縮管

pall離心濃縮管可以有效簡化核酸與蛋白的常規(guī)處理程序。只需幾分鐘,這些離心管就可以對從50ul60ml的樣品進行的濃縮和脫鹽。它可選配多種膜,確保低非特異性生物分子吸附和穩(wěn)定的高回收率,回收率通常超過90%。

1、三種常用的應(yīng)用:

濃縮——采用超濾的方法濃縮稀釋的蛋白或DNA/RNA樣品溶液是十分便捷的

脫鹽和緩沖液交換(洗濾)——超濾為去除和更好溶液中的鹽、去除變性劑、分離復(fù)合分子、去除低分子量物質(zhì)或者快速改變離子或者pH環(huán)境提供了方便而的方法。

分離-超濾無法*分離兩種分子量近似的分子。為有效分離,被分離分子的分子量差別至少要達到一個數(shù)量級(10X)。使用超濾進行分離非常,比如制備無蛋白的濾液,從DNA和蛋白樣品上分離游離狀態(tài)或者未混合的標記物,純化PCR合成反應(yīng)的產(chǎn)品。

2、與非膜工藝(層析、透析、溶劑萃取或者離心)相比,超濾具有以下優(yōu)點:

對于被處理的分子更加溫和

不需要有機萃取,也就不會導(dǎo)致蛋白變性

維持了離子和pH條件

更快,更便宜

可以在低溫下進行處理(比如在冷藏室中)

,可以同時對分子進行濃縮和純化

  

3、基于不同處理量的產(chǎn)品的選型

產(chǎn)品

樣品體積

AcroPrepTM384濾板

<100uL

AcroPrep Advance濾板

<1mL

Nanosep®離心濃縮管

<0.5mL

MicrosepTM Advance離心濃縮管

0.5-5mL

Macrosep ®Advance離心濃縮管

5-10mL

JumbosepTM離心濃縮管

20-60mL

 

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言
国产精品久久一区二区三区夜色| 免费看澡美女逼视频看看| 国产高清免费一级a久久| AV无码超清破解版流出| 操的我的逼逼好爽好多水| 天美传媒精品1区2区3区| 少妇无套带白浆嗯呢啊污| 女生的鸡鸡色色软件| 黑人大吊性交啪啪啪| 中文字幕不卡一区二区免| 日韩激情精品久久久一区二区| 欧美亚洲干妞内射| 国产成人AV一区二区在线观看| 欧美精品第15页| 狠狠色伊人亚洲综合成人| 日本不卡免费一区二区视频| 真人作爱免费视频| 99久久99久久精品视频| 欧美 亚洲 日本 国产| 插插插插插插插插插插插| 91午夜福利1000集| 免费骚逼潮吹av| 国产色哟哟精选在线播放| 欧美精品第15页| 久久精品欧美精品免费观看| 青娱乐极品视觉导航| 99亚洲精品高清一二区| 日韩欧美一级特黄大片欧| 淫荡淫水逼操烂视频| 久久精品男人的天堂av| 中文字幕人妻一区二区三区人妻| 中文字幕亚洲精品女同一页| 国产精品国产三级国| 日本乱人伦中文在线播放| 大鸡吧老外操中国逼| 中文欧美亚洲欧日韩| 国产精品视频一区二区三区八戒| 美女日逼视频免费| 大鸡巴射精在小穴动漫版| 男人和女人干污污| 交换夫妇4中文字幕|