生物通報道：細(xì)胞培養(yǎng)，對于生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室是至關(guān)重要的。zui近，BioTechniques編輯回顧了2014年對細(xì)胞培養(yǎng)和分析影響zui大的幾篇論文。了解更多……
在2014年，在BioTechniques發(fā)表的許多文章關(guān)注的是，科學(xué)家可以提高細(xì)胞培養(yǎng)研究的新方法。本月，BioTechniques編輯團(tuán)隊列出了五篇文章，將會對生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞研究，具有廣泛的影響。1. “Coating extracellular matrix proteins on a (3-aminopropyl)triethoxysilane-treated glass substrate for improved cell culture,” by Masuda et al. (April 2014)
在細(xì)胞培養(yǎng)中，表面往往用細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）成分進(jìn)行處理，以增強(qiáng)細(xì)胞的培養(yǎng)條件，并為細(xì)胞粘附和生長提供更為現(xiàn)實(shí)的環(huán)境。當(dāng)目的是影像生長中的這些細(xì)胞時，常常用載玻片作為基質(zhì)。雖然ECM涂覆的載玻片已被廣泛用于細(xì)胞分析，但是據(jù)證明，硅烷化玻璃對ECM成分的影響一直沒有得以評估。在今年4月份，日本北海道大學(xué)的Hisashi Haga及其同事，開展了一系列的實(shí)驗(yàn)，以尋找用于載玻片ECM蛋白的*涂覆條件。他們表明，與未經(jīng)處理的玻璃相比，硅烷化的玻璃可在表面產(chǎn)生更為均勻和穩(wěn)定的ECM層。這篇論文為研究人員在玻璃表面上培養(yǎng)和影像細(xì)胞，提供了一份較為清楚的指南。

2. “Platinum blue staining of cells grown in electrospun scaffolds,” by Yusuf et al. (September 2014)
如上一篇論文所證實(shí)，隨著細(xì)胞的生長影像細(xì)胞及其形態(tài)的能力，對于我們理解生物學(xué)是非常有用的。倫敦大學(xué)學(xué)院Mohammed Yusuf及其同事2014年發(fā)表的一篇強(qiáng)調(diào)細(xì)胞分析的論文，描述了當(dāng)使用電子顯微鏡（EM）時利用鉑藍(lán)進(jìn)行聚合物支架中的細(xì)胞染色。鉑藍(lán)是一種重金屬染色劑，一旦優(yōu)化用于支架上的細(xì)胞生長，就能在EM實(shí)驗(yàn)中提供增強(qiáng)的對比度，使我們感興趣的細(xì)胞在支架組件上生長的時候，能夠清晰可辨。通過將這項(xiàng)技術(shù)延伸到3D成像，并有可能在未來延伸至活細(xì)胞，EM的鉑藍(lán)染色可為細(xì)胞分析提供另一個細(xì)節(jié)層次。

3. “Marking cells with infrared fluorescent proteins to preserve photoresponsiveness in the retina,” by Fyk-Kolodziej et al. (November 2014)
跟蹤細(xì)胞或細(xì)胞群在生物研究中已經(jīng)成為司空見慣的事情。跟蹤細(xì)胞zui有效的手段，包括使用熒光蛋白和染料，當(dāng)用一種特定波長的光激活它們時，就可以成像。但是，可能會出現(xiàn)一個問題，當(dāng)用熒光蛋白標(biāo)記視網(wǎng)膜細(xì)胞時，因?yàn)闊晒獾鞍椎募せ钜部梢砸鹨暰W(wǎng)膜細(xì)胞的反應(yīng)，從而會改變實(shí)驗(yàn)的生理?xiàng)l件，并限制實(shí)驗(yàn)設(shè)計的可能性。在11月份，Tomomi Ichinose的研究小組提供了這個問題的一種解決方案，通過使用紅外熒光蛋白（iRFPs）來跟蹤視網(wǎng)膜細(xì)胞。Ichinose的研究小組顯示，使用傳統(tǒng)的熒光顯微鏡，iRFPs可以被激活和可視化，而不會干擾視網(wǎng)膜細(xì)胞的敏感性。這種新的標(biāo)記技術(shù)演示了生物學(xué)研究中存在的熒光蛋白的廣泛范圍，應(yīng)該有益于對視網(wǎng)膜細(xì)胞生物學(xué)有興趣的神經(jīng)科學(xué)家。

4. “Assessing and reducing sources of gene expression variability in Staphylococcus epidermidis biofilms ,” by Sousa et al. (December 2014)
生物膜是*天然的微生物群落。這些大的細(xì)胞聚集體以各種各樣的形式生活在一起。對生物膜遺傳學(xué)感興趣的研究人員，常常在一種生物膜或非生物膜相關(guān)細(xì)胞中分析細(xì)菌的基因表達(dá)。然而，生物膜研究中的基因表達(dá)可變性，為結(jié)果解釋帶來了問題。在12月份，Nuno Cerca帶領(lǐng)的一個研究小組，調(diào)查了這些實(shí)驗(yàn)中的所有基因表達(dá)可變性來自于哪里。Cerca的研究小組檢測了各種技術(shù)參數(shù)，zui后得知，生物膜生長是可變性的主要來源。他們建議匯集樣品，這可使實(shí)驗(yàn)中的基因表達(dá)可變性顯著更少。這種簡單的解決方案可以使生物膜中的基因表達(dá)研究，成為所有研究人員前進(jìn)的一個強(qiáng)勁動力。5. “Lyophilized Escherichia coli-based cell-free systems for robust, high-density, long-term storage,” by Smith et al. (April 2014)
第五篇zui喜歡的細(xì)胞培養(yǎng)/分析論文，來自于美國楊伯翰大學(xué)Bradley Bundy實(shí)驗(yàn)室的一篇報道，描述了一種凍干的、大腸桿菌為基礎(chǔ)的無細(xì)胞系統(tǒng)。無細(xì)胞蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)會成為生物學(xué)家有價值的工具，但是主要系統(tǒng)組件（如細(xì)胞提取物）的存儲，可能是具有挑戰(zhàn)性的。在這里，Bundy及其同事描述了一種簡單的方法，將提取物凍干成一種粉末，可以在室溫下存放很長一段時間。在室溫下存儲這些試劑的能力，應(yīng)該能夠降低存儲費(fèi)用，并提高所有研究人員對無細(xì)胞系統(tǒng)的可及性。

2014年是細(xì)胞生物學(xué)和細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)展激動人心的一年。在2015年將會發(fā)生什么？只有時間會告訴我們答案，但是我們期待在未來幾個月內(nèi)會發(fā)表更多的方法，讓你們的細(xì)胞培養(yǎng)不再辛苦，而且更加富有成效。
（生物通：王英