【中文名稱】：雞甲狀腺素(T4)ELISA 試劑盒
【英文名稱】： Chicken Thyroxine,T4 ELISA Kit
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T
【保存條件】：2-8℃低溫保存
【保質(zhì)期】：6個月，所有試劑盒均提供批次。
【試劑盒成分】：酶標(biāo)板，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等。
檢測范圍：人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬、其它動物細(xì)胞因子、植物細(xì)胞因子、骨代謝、細(xì)胞凋亡、激素內(nèi)分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體、血栓與止血、腫瘤、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒。
用于科研方面，不用于臨床診斷
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。
原理
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
雞甲狀腺素(T4)ELISA 試劑盒
Elisa試劑盒酶免實驗為保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，請按照下列良好實驗室操作規(guī)范（GLP）進(jìn)行實驗
1.要經(jīng)常檢查酶標(biāo)儀和微量轉(zhuǎn)移器的精度和準(zhǔn)確度；
2.使用前，試劑儲存在2-8℃。
3.在進(jìn)行分析操作之前，請將所有的試劑回溫到室溫（20-25℃）；
4。所有的 試劑在使用前，通過輕輕地翻轉(zhuǎn)搖動進(jìn)行充分的混合，但不要引起泡沫；
5.實驗開始，所有的操作步驟應(yīng)該在規(guī)定的時間內(nèi)完成，不要中斷或超時；
6.實驗過程中注意保證溫度（20-25℃）；
7.不要將不同批次的試劑混用，不要使用過期的試劑；
8.每個樣品只能用自己的吸頭，不能混用，防止交叉感染；
9.所有的樣品和標(biāo)志物必須同時使用，所有的實驗條件保持*；
10.按照實驗所需的量取用試劑，未用完的試劑不要倒回原瓶中；
11.所有的試劑瓶操作完成后立即蓋好蓋，不要將不同試劑瓶的蓋混蓋。
規(guī)格48Test/96Test
Elisa試劑盒 保存溫度：2-8C
實驗準(zhǔn)備
- 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
- 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
- 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
- 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物也不能使用。
- 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
- 在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。
- 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
- 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白容劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成份都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑 的生物活性。
- 不能使用過期產(chǎn)品。
- 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)保管好，按照規(guī)定的程序處理樣品或檢測裝置。
試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
- 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶：試劑盒提供6管標(biāo)準(zhǔn)品，沒管已標(biāo)定濃度，并且凍干。試驗前在每個標(biāo)準(zhǔn)品管中加入0.5ml*，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動助其溶解，使其恢復(fù)為每個標(biāo)準(zhǔn)品管身標(biāo)注的濃度。
- 20X洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1:20稀釋，即1份20X洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
注意事項：
- 標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。保存過久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底部加深。
- 凍結(jié)標(biāo)本溶解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混均宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混合，不要再混均器上強(qiáng)烈震蕩。
- 渾濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。
- 反復(fù)凍融會使蛋白效率降低，所以代測樣本如需保存做多次檢測，宜少量分裝冰存。
ELISA實驗標(biāo)準(zhǔn)曲線平直一般有以下原因：標(biāo)準(zhǔn)曲線制備是否不當(dāng)，洗孔不凈，洗孔不充分讀數(shù)不準(zhǔn)確或吸量有誤。查找原因，即可找到相應(yīng)的解決方案。
操作步驟
- 從室溫平衡20分鐘后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
- 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔哥加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50ul。
- 樣本孔中加入待測樣本50ul；空白孔不加.
- 除空白孔外標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100ul，用封板膜封住反應(yīng)孔，37C水浴鍋或恒溫箱溫育60min.
- 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350ul）,靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此反復(fù)4-5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
- 每孔加入底物A、B各50ul，15min內(nèi)，在450nm波長處測定個孔的OD值。
環(huán)保在線