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上海遠(yuǎn)研生物科技有限公司資料大小
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426次人白細(xì)胞介素33(IL-33)酶聯(lián)免疫檢測
試劑盒使用說明書
使用前仔細(xì)閱讀本說明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于*雙抗體夾心技術(shù)原理,來檢測人白細(xì)胞介素33(IL-33)),只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。
用 途: 用于人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素33(IL-33)的測定。
工作原理
本試劑盒采用的是*雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定樣品中人白細(xì)胞介素33(IL-33)的水平。向預(yù)先包被了人白細(xì)胞介素33(IL-33)單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入白細(xì)胞介素33(IL-33),溫育;溫育后,加入*標(biāo)記的抗IL-33抗體,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶,然后加入底物A、B,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺與樣品中人白細(xì)胞介素33(IL-33)的濃度呈正相關(guān)。
試劑盒組成
1 | 標(biāo)準(zhǔn)品(2400ng/L) | 0.5ml | 7 | 顯色劑A液 | 6ml |
2 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 3ml | 8 | 顯色劑B液 | 6ml |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 9 | 終止液 | 6ml |
4 | 鏈霉親和素-HRP | 6ml | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | *標(biāo)記的抗- IL-33抗體 | 1ml | 12 | 密封袋 | 1個(gè) |
需要而未提供的試劑和器材
注意事項(xiàng)
洗板方法
手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
標(biāo)本要求
1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
操作程序
1200ng/L | (5號標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | (4號標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | (3號標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | (2號標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
75ng/L | (1號標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計(jì)算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。
操作程序總結(jié):
準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,*標(biāo)記二抗和酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)60分鐘
洗板5次,加入顯色液A、B,37℃顯色10分鐘
加入終止液
10分鐘之內(nèi)讀OD值
計(jì)算
檢測范圍:5ng/L→2000ng/L。
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