β-乳球蛋白說明書 酶聯(lián)免疫分析 β-乳球蛋白水平

目的：本試劑盒用于測定乳糖及相關(guān)液體樣本中β-乳球蛋白的含量。

β-乳球蛋白說明書 酶聯(lián)免疫分析 β-乳球蛋白水平

規(guī)格：96T/48T

說明書    1份    1份
封板膜    2片（48）    2片（96）
密封袋    1個    1個
酶標包被板    1×48    1×96
標準品：7200μg/ml    0.5ml×1瓶    0.5ml×1瓶
標準品稀釋液    1.5ml×1瓶    1.5ml×1瓶

β-乳球蛋白說明書 酶聯(lián)免疫分析 β-乳球蛋白水平

實驗原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中β-乳球蛋白水平。用純化的β-乳球蛋白抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入β-乳球蛋白，再與HRP標記的β-乳球蛋白抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β-乳球蛋白呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中β-乳球蛋白濃度。

樣本處理及要求：

1. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復凍融.

2. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為4800μg/ml，3200μg/ml ，1600μg/ml，800μg/ml，400μg/ml）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

注意事項：

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

β-乳球蛋白說明書 酶聯(lián)免疫分析 β-乳球蛋白水平廣銳生物匯集Elisa試劑盒（種屬標本：人、大鼠、小鼠、兔子、雞、豬、牛、豚鼠、犬、馬、猴、羊、各類植物等等）、標準品|對照品、抗體、培養(yǎng)基、試劑為一體的科研產(chǎn)品供應(yīng)商，國內(nèi)各省市地區(qū)，擁有雄厚的實力、合理的價格和優(yōu)良的技術(shù)服務(wù)，能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求，
國家重點實驗室及國內(nèi)各大院校長期供應(yīng)商：