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更新時間:2018-02-14 06:06:18瀏覽次數(shù):181次
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我公司*經(jīng)營“人γ肽(Pγ)ELISA試劑盒"等elisa試劑盒及生物試劑、酶、細胞等生物化學(xué)試劑。各類產(chǎn)品齊全,價格實惠,質(zhì)量有保證,并且可以提供免費代測,請您放心選購,咨詢!
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在人γ肽(Pγ)ELISA試劑盒實驗中我們需要注意一些實驗誤差的問題,下面就是為實驗減少誤差的具體操作步驟:
1.實驗使用前,將所有試劑充分搖勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免在實驗加樣時加入大量的氣泡,實驗時在加樣上產(chǎn)生誤差。
2.根據(jù)待檢測樣品的數(shù)量加上標(biāo)準品的數(shù)量決定所需要使用的板條數(shù)。每個標(biāo)準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品需根據(jù)自己的數(shù)量來定,如在實驗中能使用復(fù)孔的則盡量做復(fù)孔。
3.將稀釋好后的標(biāo)準品50ul加入反應(yīng)孔、并加入待測樣品50ul在反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩使其均勻,在37℃的條件下溫育1小時。
4.以上實驗結(jié)束后即甩去孔內(nèi)的液體,每孔均加滿洗滌液,振蕩30秒后,甩去孔內(nèi)的洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)操作3次即可。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)則需增加一次。
5.在每孔中加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩使其搖勻,在37℃的條件下溫育30分鐘。
6.將孔內(nèi)的液體甩去,將每個孔中加滿洗滌液,振蕩30秒后,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7. 將每個孔中均加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩搖勻,在37℃的條件下溫育10分鐘。注意:避免光照。
8.在取出酶標(biāo)板時,即迅速加入50ul終止液,加入終止液后立即測定結(jié)果。
9.zui后即在450nm波長處測定各孔的OD值。
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